Культура ткани в цитологии

Условия культивирования

Клетки обычно помещают в стеклянные сосуды, отсюда и исследования получили название изучение in vitro (от лат. In — в, vitro — стекло), хотя теперь чаще культуры выращивают в пластмассовых сосудах.

Выделенные из тканей клетки инкубируют при температуре 38 ° C 39 ° C (для клеток животного и человеческого организмов) и при 22 ° C 28 ° C (для растительных клеток) в питательной среде соответствующего состава.

Клетки тогда растут в виде суспензии или монослоя. Суспензионная культура — это выращивание отдельных клеток или небольших их групп во взвешенном состоянии в жидкой питательной среде с использованием аппаратуры, обеспечивающей их аэрацию и перемешивание.

Характерной особенностью суспензионных культур является их морфологическая и биохимическая гетерогенность. Клеточная популяция содержит клетки, которые отличаются по размеру и форме.

Применение

В цитологии данный метод удобен тем, что клетки в культуре легко доступны для различных биохимических манипуляций. При работе с ними радиоактивные вещества, яды, гормоны и др.

могут быть введены в нужной концентрации в течение требуемого времени. Количество этих веществ может быть на порядок меньше, чем при эксперименте на животных.

Исчезает угроза того, что вещество будет Метаболизированный печенью, экскретироваться почками или отложится в мышцах. Это обеспечивает получение реальных значений скорости действия вещества на клетку или ее усвоения клеткой.

Для исследования живых растительных клеток используют культуру изолированных протопластов. Изолированные протопласты можно определить как «голые» клетки растений, поскольку клеточная стенка удаляется механическим или ферментативным способом.

Система изолированных протопластов дает возможность вести селекцию на клеточном уровне, работать в малом объеме с большим количеством индивидуальных клеток, получать новые формы растений путем прямого переноса генов, получать соматические гибриды между удаленными в систематическом отношении видами.

Поскольку в изолированных протопластах сразу начинается регенерация клеточной оболочки, то они являются удобным объектом для изучения формирования целлюлозных микрофибрилл.

В вирусологии культуры клеток используются очень широко, поскольку с ними сравнительно легко работать в лаборатории, в отличие от других методов — выращивание вирусов на куриных эмбрионах или в организме живых животных.

Кроме того, на монослое клеточной культуры можно хорошо изучить цитопатическое действие вирусов, по образованию внутри- клеточных включений, бляшек, в реакциях гемадсорбции и гемагглютинации и по цветовой пробоя.

При работе с культурами клеток существенные результаты могут быть получены при работе с небольшим количеством культур. Эксперименты, которые требуют для подтверждения того или иного факта сотни или тысячи лабораторных животных могут быть с равным статистической достоверностью поставлены на таком же количестве культур клеток.

Также изучается трансформация клеток вирусами, механизм которой подобен механизму возникновения злокачественных опухолей.

Культуры клеток широко применяются для тестирования действия веществ, которые могут быть использованы в качестве лекарственных препаратов. Несмотря на то, что результаты, полученные на культурах клеток нельзя экстраполировать на весь организм, не вызывает сомнения, что если то или иное вещество нарушает деятельность клеток из нескольких разных линиях культур, то необходимо ожидать негативного эффекта и при введении этого вещества в организм.

WO2011008132A1 - Низкомолекулярные модуляторы фармакологической ...

Специфические культуры клеток является ценным источником гормонов и других биологически активных веществ. Уже сейчас они применяются для производства противовирусного белка интерферона.

В генетике способность клеток к росту в культуре используется в следующих направлениях:

  • Клонирование
  • Хранение клеток
  • Получение мутантных клеток и работа с ними

Типы культур клеток

1. Первично-трипсинизовани — получают из измельченных тканей человека и животных путем их обработки трипсином или другими ферментами. Выдерживают лишь 5-10 делений (пассажей).

2. перевиваемых — клетки, которые приобрели способность к безграничному размножению, поскольку являются производными опухолей человека и животных.

3. Напивперещеплювани (диплоидные) — могут выдерживать до 100 пассажей, сохраняя при этом исходный диплоидный набор хромосом.

Линия клеток Расшифровка сокращения Организм Ткань Морфология Примечания и ссылки
293-T человек почка (эмбриональная) Производная от HEK-293 ECACC
3T3 cells «3-day transfer, inoculum 3 x 105 cells» мышь эмбриональные фибробласты Известна также как NIH 3T3 ECACC
721 человек меланома
9L крыса глиобластома
A2780 человек яичник рак яичника ECACC
A2780ADR человек яичник производное A2780 с резистентностью к адриамицин ECACC
A2780cis человек яичник производное A2780 с резистентностью к цисплатина ECACC
A172 человек глиобластома злокачественная глиома ECACC
A431 человек кожаный эпителий плоскоклеточная карцинома ECACCCell Line Data Base
A-549 человек карцинома легких эпителий DSMZECACC
B35 крыса нейробластома ATCC
BCP-1 человек периферические лейкоциты HIV лимфома ATCC
BEAS-2B bronchial epithelium adenovirus 12-SV40 virus hybrid (Ad12SV40) человек легкие эпителий ATCC
bEnd.3 brain endothelial мышь кора головного мозга эндотелий ATCC
BHK-21 «Baby Hamster Kidney» хомяк почка фибробласты ECACCOlympus
BR 293 человек молочная железа рак
BxPC3 Biopsy xenograph of pancreatic carcinoma line 3 человек панкреатическая аденокарцинома эпителий ATCC
C3H-10T1 / 2 мышь эмбриональные мезенхимальные клетки ECACC
C6 / 36 комар ткани личинки ECACC
CHO Chinese hamster ovary Cricetulus griseus яичник эпителий ECACCICLC
COR-L23 человек легкие ECACC
COR-L23 / CPR человек легкие ECACC
COR-L23 / 5010 человек легкие ECACC
COR-L23 / R23 человек легкие эпителий ECACC
COS-7 Cercopithecus aethiops, origin-defective SV-40 обезьяна Cercopithecus aethiops почка фибробласты ECACCATCC
CML T1 Chronic Myelod Leukaemia T-lymphocyte 1 человек хроническая миелоидна лейкемия T-клеточная лейкемия Blood
CMT canine mammary tumor собака молочная железа эпителий
D17 собака остеосаркома ECACC
DH82 собака гистиоцитоз моноциты / макрофаги ECACC

J Vir Meth

DU145 человек карцинома простата
DuCaP Dura mater Cancer of the Prostate человек метастатический рак простаты эпителий 11317521
EL4 мышь T-клеточная лейкемия ECACC
EMT6 / AR1 мышь молочная железа эпителий ECACC
EMT6 / AR10.0 мышь молочная железа эпителий ECACC
FM3 человек метастазы в лимфатический узел меланома
H1299 человек легкие рак
H69 человек легкие ECACC
HB54 Гибридома Гибридома секретирует L243 mAb (против HLA-DR) Human Immunology
HB55 Гибридома Гибридома секретирует MA2.1 mAb (против HLA-A2 и HLA-B17) Journal of Immunology
HCA2 человек фибробласты Journal of General Virology
HEK-293 human embryonic kidney человек почка (эмбриональная) эпителий ATCC
HeLa Henrietta Lacks человек рак шейки матки эпителий DSMZECACC
Hepa1c1c7 clone 7 of clone 1 hepatoma line 1 мышь гепатома эпителий ECACC

ATCC

HL-60 human leukemia человек миелобласты клетки крови ECACCDSMZ
HMEC human mammary epithelial cell человек эпителий ECACC
HT-29 человек эпителий толстого кишечника аденокарцинома ECACC

Cell Line Data Base

Jurkat человек T-клеточная лейкемия белые клетки крови ECACC

DSMZ

JY человек лимфобласты В-клетки, имортализовани EBV
K562 человек лимфобласты хронической миелоидной лейкемией ECACC
Ku812 человек лимфобласты эритролейкемию ECACC

LGCstandards

KCL22 человек лимфобласты хронической миелоидной лейкемией
KYO1 Kyoto 1 человек лимфобласты хронической миелоидной лейкемией DSMZ
LNCap Lymph node Cancer of the Prostate человек аденокарцинома простаты эпителий ECACCATCC
Ma-Mel 1, 2, 3 … .48 человек линии клеток меланомы
MC-38 мышь аденокарцинома
MCF-7 Michigan Cancer Foundation-7 человек молочная железа инвазивная карцинома протоков молочной железы ER , PR
MCF-10A Michigan Cancer Foundation человек молочная железа эпителий ATCC
MDA-MB-231 MD Anderson — Metastatic Breast человек молочная железа рак ECACC
MDA-MB-468 MD Anderson — Metastatic Breast человек молочная железа рак ECACC
MDA-MB-435 MD Anderson — Metastatic Breast человек молочная железа меланома или карцинома (единое мнение отсутствует) Cambridge Pathology ECACC
MDCK II Madin Darby canine kidney собака почка эпителий ECACC ATCC
MOR / 0.2R человек легкие ECACC
NCI-H69 / CPR человек легкие ECACC
NCI-H69 / LX10 человек легкие ECACC
NCI-H69 / LX20 человек легкие ECACC
NCI-H69 / LX4 человек легкие ECACC
NIH-3T3 National Institutes of Health, 3-day transfer, inoculum 3 x 10 май cells мышь эмбрион фибробласты ECACCATCC
NALM-1 периферическая кровь хронической миелоидной лейкемией Cancer Genetics and Cytogenetics
NW-145 меланома ESTDAB
OPCN / OPCT Onyvax Prostate Cancer …. линии клеток рака простаты Asterand
Peer человек T-клеточная лейкемия DSMZ
PNT-1A / PNT 2 линии клеток рака простаты ECACC
RenCa Renal Carcinoma мышь карцинома почки
RIN-5F мышь поджелудочная железа
RMA / RMAS мышь T-клеточный рак
Saos-2 человек остеосаркома ECACC
Sf-9 Spodoptera frugiperda бабочка Spodoptera frugiperda яичник DSMZECACC
SkBr3 человек карцинома молочной железы
T2 человек Гибридома В-клеток и Т-клеточной лейкемии DSMZ
T-47D человек молочная железа карцинома протоков
T84 человек карцинома толстого кишечника / метастазы в легкие эпителий ECACCATCC
THP1 человек моноциты острый миелоидный лейкоз ECACC
U373 человек глиобластома-астроцитома эпителий
U87 человек глиобластома-астроцитома эпителий Abcam
U937 человек лейкемическая моноцитарная лимфома ECACC
VCaP Vertebra Prostate Cancer человек метастатический рак простаты эпителий ECACC ATCC
Vero «Vera Reno ‘/’ Vero» («истина») африканская зеленая мартышка эпителий почки ECACC
WM39 человек кожа первичная меланома
WT-49 человек лимфобласты
X63 мышь меланома
YAC-1 мышь лимфома Cell Line Data Base ECACC
YAR человек B-лимфоциты трансформированные EBV Human Immunology
Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицинский взгляд на еду
Adblock
detector