Методы исследования в гистологии и цитологии

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В ГИСТОЛОГИИ И ЦИТОЛОГИИ

Гистология

Гистология – («гистос» греч. – ткань,

логис — учение)

наука о строении, развитии и

жизнедеятельности тканей многоклеточных

организмов и человека. Невооруженному глазу

недоступны объекты, являющиеся предметом


этой науки. Поэтому и история гистологии

тесно связана с истроией создания таких

приборов,

которые

позволяют

изучить

мельчайшие предметы, невооруженным глазом.

методы исследования в гистологии и цитологии

Курс гистологии условно разделен на

1. Цитология — наука о клетке.


2. Эмбриология — наука о развитии, от

зарождения до полного формирования

организма.

3. Общая гистология — наука об общих

закономерностях, присущих тканям.

4. Частная гистология — изучает строение,


развитие органов и систем.

ЦИТОЛОГИЯ – (греч. κύτος «клетка»

и λόγος — «учение», «наука»)

Раздел биологии, изучающий

живые клетки, их органоиды, их строение,

функционирование, процессы клеточного

Методы исследования в гистологии и цитологии

размножения, старения и смерти.

(от др.-греч. ἔμβρυον — эмбрион, зародыш


-λογία от λόγος — учение) — это наука,

изучающая развитие зародыша.

История создания клеточной теории

1590 год. Янсен изобрел микроскоп, в котором увеличение

обеспечивалось соединением двух линз.

1665 год. Роберт Гук впервые употребил термин клетка.

1650-1700 годы. Антони ван Левенгук впервые описал бактерии и

другие микроорганизмы.

1700-1800 годы. Опубликовано много новых описаний и рисунков


различных тканей, преимущественно растительных.

1827 году Карл Бэр обнаружил яйцеклетку у млекопитающих.

1831-1833 годы. Роберт Броун описал ядро в растительных

клетках.

1838-1839 годы. Ботаник Матиас Шлейден и зоолог Теодор Шванн

объединили идеи разных ученых и сформулировали клеточную

теорию, которая постулировала, что основной единицей структуры

и функции в живых организмах является клетка.

1855 год. Рудольф Вирхов показал, что все клетки образуются в


результате клеточных делений.

1590 год. Микроскоп Янсена

1665 год. Рассматривая под микроскопом срез пробки, английский

ученый, физик Роберт Гук обнаружил, что она состоит из ячеек,

разделенных перегородками. Эти ячейки он назвал «клетками»

В XVII столетии Левенгук сконструировал

Методы исследования в гистологии и цитологии


микроскоп и открыл людям дверь в микромир.

Перед глазами изумленных исследователей

замелькали разнообразнейшие инфузории,

коловратки и прочая мельчайшая живность.

Оказалось, что они повсюду – эти мельчайшие

организмы: в воде, навозе, в воздухе и пыли, в

земле и водосточных желобах, в гниющих

отходах животного и растительного


происхождения.

1831-1833 годы. Роберт Броун описал ядро в растительных клетках.

В 1838 г. немецкий ботаник М.Шлейден привлек внимание к ядру,

считал его образователем клетки. По Шлейдену, из зернистой

субстанции конденсируется ядрышко, вокруг которого формируется

ядро, а вокруг ядра — клетка, причём ядро в процессе образования


клетки может исчезать.

Немецкий зоолог Т.Шванн показал, что из

клеток состоят и ткани животных.

ВВЕДЕНИЕ. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В ГИСТОЛОГИИ, ЦИТОЛОГИИ И ЭМБРИОЛОГИИ. КЛЕТОЧНАЯ ТЕОРИЯ

Он создал теорию, утверждающую, что

клетки, содержащие ядра, представляют

собой структурную и функциональную

основу всех живых существ.

Клеточная теория строения была

сформулирована и опубликована


Т.Шванном в 1839 г. Суть её можно

1. Клетка – элементарная структурная единица строения всех живых

существ;

2. Клетки растений и животных самостоятельны, гомологичны друг другу

по происхождению и структуре. Каждая клетка функционирует

независимо от других, но вместе со всеми.


3. Все клетки возникают из бесструктурного межклеточного

вещества. (Ошибка!)

4. Жизнедеятельность клетки определяется оболочкой. (Ошибка!)

В 1855 г. немецкий врач Р.Вирхов сделал обобщение: клетка может

возникнуть только из предшествующей клетки. Это привело к

осознанию того факта, что рост и развитие организмов связаны с

делением клеток и их дальнейшей дифференцировкой, приводящей к

образованию тканей и органов.


Карл Бэр

Еще в 1827 году Карл Бэр обнаружил яйцеклетку у млекопитающих,

доказал, что развитие млекопитающих начинается с оплодотворенной

яйцеклетки.

Значит развитие любого организма начинается с одной

оплодотворенной яйцеклетки, клетка является единицей развития.

Методы исследования в гистологии и цитологии

1865 г. Опубликованы законы наследственности (Г.Мендель).

1868 г. Открыты нуклеиновые кислоты (Ф. Мишер)

1873 г. Открыты хромосомы (Ф. Шнейдер)


1874 г. Открыт митоз у растительных клеток (И. Д. Чистяков)

1878 г. Открыто митотическое деление животных клеток

(В. Флеминг, П. И. Перемежко)

1879 г. Флеминг – поведение хромосом во время деления.

1882 г. Открыт мейоз у животных клеток (В. Флеминг)

1883 г. Показано, что в половых клетках число хромосом в

два раза меньше, чем в соматических (Э. Ван Бенеден)

1887 г. Открыт мейоз у растительных клеток (Э. Страсбургер)

1898 г. Гольджи открыл сетчатый аппарат клетки, аппарат Гольджи.


1914 г. Сформулирована хромосомная теория наследственности

(Т.Морган).

1924 г. Опубликована естественно-научная теория происхождения

жизни на Земле (А.И.Опарин).

1953 г. Сформулированы представления о структуре ДНК и создана

Методы исследования в гистологии и цитологии

ее модель (Д.Уотсон и Ф.Крик).

1961 г. Определены природа и свойства генетического кода


(Ф.Крик,

Л.Барнет, С.Беннер).

Основные положения современной клеточной теории

1. Клетка — элементарная живая система, единица строения,

жизнедеятельности, размножения и индивидуального развития

организмов.

2. Клетки всех живых организмов гомологичны, едины по строению и


происхождению.

3. Образование клеток. Новые клетки возникают только путем

деления ранее существовавших клеток.

4. Клетка и организм. Клетка может быть самостоятельным

организмом (прокариоты и одноклеточные эукариоты). Все

многоклеточные организмы состоят из клеток.

5. Функции клеток. В клетках осуществляются: обмен веществ,


раздражимость и возбудимость, движение, размножение и

дифференцировка.

6. Эволюция клетки. Клеточная организация возникла на заре жизни и

прошла длительный путь эволюционного развития от безъядерных

форм (прокариот) к ядерным (эукариотам).

ОКСИФИЛИЯ способность

окрашиваться

кислыми

красителями в

розовый цвет

Базофилия способность

окрашиваться

основными красителями


в синий цвет

Нейтрофилия –

способность

окрашиваться кислыми и

в фиолетовый цвет.

— это элементарная живая система,

ЦИТОЛОГИЯ – (греч. κύτος «клетка» и λόγος — «учение», «наука»)

состоящая из цитоплазмы, ядра, оболочки


и являющаяся основой развития, строения

и жизнедеятельности животных и

растительных организмов.

Просим использовать работы, опубликованные на сайте, исключительно в личных целях. Публикация материалов на других сайтах запрещена.

ЭМБРИОЛОГИЯ

Данная работа (и все другие) доступна для скачивания совершенно бесплатно. Мысленно можете поблагодарить ее автора и коллектив сайта.

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Подобные документы

История зарождения гистологии как науки. Гистологические препараты и методы их исследования. Характеристика этапов приготовления гистологических препаратов: фиксация, проводка, заливка, резка, окрашивание и заключение срезов. Типология тканей человека.

Основной предмет изучения гистологии. Главные этапы гистологического анализа, объекты его исследования. Процесс изготовления гистологического препарата для световой и электронной микроскопии. Флюоресцентная (люминесцентная) микроскопия, сущность метода.

Методы изучения морфологии микроорганизмов при микроскопии препаратов, приготовленных из чистых культур путем окрашивания. Способы витальной окраски микроорганизмов для избежания артефактов, появляющихся в результате токсического действия красителя.

Гистология — наука о строении, развитии и жизнедеятельности тканей животных организмов и общих закономерностях тканевой организации; понятие цитологии и эмбриологии.

Методы световой микроскопии, темного поля, фазового контраста, наблюдения в инфракрасных и ультрафиолетовых лучах, в свете люминесценции. Поляризационная, электронная микроскопия.

Определение назначения и описание механизма гистохимических методов идентификации химических веществ в гистологических срезах. Описание электронной, люминесцентной и ультрафиолетовой микроскопии. Радиоавтография и культура клеток и тканей вне организма.

Классификация и номенклатура ферментных препаратов, характеристика их активности. Микробиологический и биохимический контроль производства. Регуляция синтеза и технологические схемы производства микробных протеиназ. Экстрагирование ферментных препаратов.

Особенности разработки учениками старших классов социального проекта для благоустройства и эстетического оформления цветников на территории г. Перевоз.

Методы исследования в гистологии и цитологии

Открытие феномена эмбриональной регуляции. Эксплантация и трансплантация ядер. Метод экстракорпорального оплодотворения. Изучение фиксированных срезов зародышей с помощью световой и электронной микроскопии, гисторадиоавтографии, гисто — и иммуноцитохимии.

История гистологии — раздела биологии, изучающего строение тканей живых организмов. Методы исследования в гистологии, приготовление гистологического препарата.

Методы исследования в гистологии включают приготовление гистологических препаратов и их изучение с помощью микроскопа.

Гистологическая техника

1.Световая микроскопия.

2.Ультрафиолетовая микроскопия.


3.Флюоресцентная (люминесцентная)

микроскопия.

4.Фазово-контрастная микроскопия.

5.Микроскопия в темном

поле.

6. Интерференционная микроскопия

7. Поляризационная микроскопия.

8. Электронная микроскопия.

Фиксация

Фиксирующая

жидкость.

Криофиксация

Лиофилизация

Обезвоживание

26. МИКРОСКОПЫ

микроскопия.


поле.

Этот оптический прибор

позволяет наблюдать мелкие

объекты. Увеличение

изображения достигается


системой линз объектива и

окуляра. Зеркало, конденсор и

диафрагма направляют световой

поток и регулируют освещение

объекта. Механическая часть


микроскопа включает: штатив,

предметный столик, макро- и

микрометрический винты, тубус,

тубусодержатель.

— фазовоконтрастный микроскоп — (для изуч. живых


неокраш-х обьектов)- микроскопия позволяет изучать живые и

неокрашенные объекты. При прохождении света через окрашенные объекты

изменяется амплитуда световой волны, а при прохождении света через

неокрашенные – фаза световой волны, что и используют для получения

высококонтрастного изображения в фазово-контрастной и

интерференционной микроскопии.

— темнопольный микроскоп (для изуч. живых неокраш-х обьектов).

Используют специальный конденсор, выделяющий контрастирующие

структуры неокрашенного материала. Темнопольная микроскопия


позволяет наблюдать живые объекты. Наблюдаемый объект выглядит как

освещённый на тёмном поле. При этом лучи от осветителя падают на объект

сбоку, а в линзы микроскопа поступают только рассеянные лучи.

люминесцентный мик-п (для изуч. живых неокраш-х обьектов)

микроскопия применяется для наблюдения флюоресцирующих


(люминесцирующих) объектов. В люминесцентном микроскопе свет от

мощного источника проходит через два фильтра. Один фильтр задерживает

свет перед образцом и пропускает свет длины волны, возбуждающей

флюоресценцию образца. Другой фильтр пропускает свет длины волны,

излучаемой флюоресцирующим объектом. Таким образом,

флюоресцирующие объекты поглощают свет одной длины волны и

излучают в другой области спектра.

-ультрафиолетовый


способность м-па)

мик-п (повышает разрешающую

-поляризационный мик-п (для иссл. обьектов с упорядочонным

располажением молекул — скелет. муск-ра, коллагеновые волокна и т.д.) микроскопия – формирование изображения неокрашенных анизотропных

структур (например, коллагеновые волокна и миофибриллы).

-интерфекренционная микроскопия (для опред-я сухового

остатка в клетках, определение толщины обьектов) — микроскопия

объединяет принципы фазово-контрастной и поляризационной


микроскопии и применяется для получения контрастного

изображения неокрашенных объектов. Специальная

интерференционная оптика (оптика Номарского) нашла применение

в микроскопах с дифференциальным интерференционным

контрастом.

-трансмиционная (изучение обьектов на просвет)

-сканирующий (изучение поверхности обьектов)

Теоретически разрешение просвечивающего ЭМ составляет 0,002

нм. Реальное разрешение современных микроскопов приближается


к 0,1 нм. Для биологических объектов разрешение ЭМ на практике

Методы исследования в гистологии и цитологии

составляет 2 нм.

Просвечивающий электронный микроскоп состоит из

колонны, через которую в вакууме проходят электроны, излучаемые

катодной нитью. Пучок электронов, фокусируемый кольцевыми


магнитами, проходит через подготовленный образец. Характер

рассеивания электронов зависит от плотности образца. Проходящие

через образец электроны фокусируют, наблюдают на

флюоресцирующем экране и регистрируют при помощи

фотопластинки.

Сканирующий электронный микроскоп применяют для


получения трёхмерного изображения поверхности исследуемого объекта.

Метод сколов (замораживание-скалывание) применяют для изучения

внутреннего строения клеточных мембран. Клетки замораживают при

температуре жидкого азота в присутствии криопротектора и

используют для изготовления сколов. Плоскости скола проходят через

гидрофобную середину двойного слоя липидов. Обнажённую

внутреннюю поверхность мембран оттеняют платиной, полученные

реплики изучают в сканирующем ЭМ.

Эл. микроскопия

1.Цито- или гистохимия — суть заключается использовании

строгоспецифических химических реакций с светлым конечным

продуктом в клетках и тканях для определения количества различных

веществ(белков, ферментов, жиров, углеводов и т. д.). Можно применить


на уровне светового или электронного микроскопа.

2. Цитофотометрия — метод применяется в комплексе с 1 и дает

возможность количественно оценить выявленные цитогистохимическим

методом белки, ферменты и т.д.

3. Авторадиография — вводят в организм вещества, содержащие

радиоактивные изотопы химических элементов. Эти вещества

включаются в обменные процессы в клетках. Локализацию, дальнейшие

перемещения этих веществ в органах определяются на гистопрепаратах


по излучению, которое улавливается фотоэмульсией, нанесенной на

препарат.

4. Рентгентоструктурный анализ — позволяет определить количество

химических элементов в клетках, изучить молекулярную структуру

биологических микрообьектов.

5. Морфометрия — измерение размеров биол. структур на клеточном и

субклеточном уровне.

6. Микроургия — проведение очень тонких операций


микроманипулятором под микроскопом (пересадка ядер, введение

в клетки различных веществ, измерение биопотенциалов и т.д.)

6. Метод культивирования клеток и тканей — в питательных

средах или в диффузионных камерах, имплантированных в

различные ткани организма.

7. Ультрацентрофугирование — фракционирование клеток или


субклеточных структур путем центрофугирования в растворах

различной плотности.

8. Экспериментальный метод.

9. Метод трансплантации тканей и органов.

Гликокаликс- надмембранный комплекс , состоит из

сахаридов, связанных с белками и сахаридов,


связанных с липидами.

Функции

Рецепция (гормоны, цитокины, медиаторы и

антигены)

Межклеточные взаимодействия(раздражимость и

узнавание)

Пристеночное пищеварение (микроворсинки

каемчатых клеток кишечника)

21. Специальые методы микроскопирования

-ультрафиолетовый


способность м-па)

контрастом.

составляет 2 нм.

фотопластинки.

Эл. микроскопия

25. Специальные (немикроскопические) методы

препарат.

Судан III –окраска липидов и жиров в

оранжевый цвет;

осмиевая кислота – окраска липидов и

жиров в черный цвет;

орсеин -окраска эластических волокон

в коричневый цвет;


азотнокислое серебро – импрегнация

нервных элементов в темнокоричневый цвет.

32. Фиксация

Фиксация сохраняет структуру клеток, тканей и

органов, предотвращает их бактериальное

загрязнение и ферментное

переваривание, стабилизирует макромолекулы


путём их химического сшивания.

33. Фиксирующая жидкость

формалин, спирты, глутаральдегид — Наиболее распространённые

фиксаторы;

Криофиксация — Лучшую сохранность структур

обеспечивает мгновенное замораживание образцов в

жидком азоте (–196 °С);


Лиофилизация – небольшие кусочки ткани подвергаются быстрому

замораживанию, прекращающему метаболические процессы.

Обезвоживание- стандартная процедура удаления воды-обезвоживание

в спиртах, возрастающей крепости (от 70 до 60%).

Заливка – делает ткань прочной, предотвращает её раздаваливание и

сминание при резании, дает возможность получать срезы стандартной

толщины. Наиболее распространенная среда для заливки – парафин.


Используют также – целлоидин, пластически среды и смолы.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицинский взгляд на еду
Adblock
detector