Техника приготовления препаратов-мазков, их фиксация и окраска || Методы окраски цитологических мазков

1В. Теоретический материал

1.
Микробиология как наука

1.1.
Определение

1.2.
Классификация микробиологических
наук

1.3.
Задачи медицинской микробиологии

1.4.
Микробиологические методы исследования

1.5.
История развития микробиологии

1.6.
Основоположники научной микробиологии
Пастер и Кох

1.7.
Развитие микробиологии в Беларуси

2.
Систематика микроорганизмов

2.1.
Типы таксономии биологических объектов

2.2.
Признаки, лежащие в основе современной
таксономии микроорганизмов

2.3.
Иерархическая система таксонов,
применяемых в бактериологии и
вирусологии

6.
Методы изучения морфологии бактерий.

6.1.
Методы микроскопии

6.2.
Методы окраски мазков

Окраска по Муромцеву

  1. Фуксин основной

0,15
г.

Спирт-ректификат
96%

20
мл

Карболовая
кислота (кристаллическая)

10
г.

  1. Метиленовая
    синька

2,5 г.

Дистиллированная
вода

200
мл.

После
растворения краски оба раствора смешивают
и профильтровывают через бумажный
фильтр. Краска сохраняется долгое время.
Мазки красят через полоски фильтровальной
бумаги в течение 15 – 30 секунд.

Фиксацию
мазков автор рекомендует производить
смесью спирта (80 частей) с формалином
(20 частей) в течение 3—10 минут.

При
данной окраске мазков в микробных
клетках выявляются включения, биполярность,
капсулы и споры. Метод удобен для окраски
мазков из органов, крови, культур на
средах с нативным белком и на полужидком
агаре.

Фон
препарата из указанных субстратов
розовый; клетки ткани и микробные тела
окрашиваются в голубовато-синие цвета.

1.2. Классификация микробиологических наук

Микробиология
представляет собой целый комплекс
биологических наук, которые можно
классифицировать или по объекту изучения
или по прикладным целям.

А. В
зависимости от объекта
изучения
различают общую микробиологию и так
называемые частные микробиологические
науки (бактериология, микология,
протозоология и вирусология).


1. Общая
микробиология
изучает общие закономерности структуры
и функционирования микробной клетки.

2.
Бактериология
изучает прокариотические микроорганизмы
– бактерии.

3.
Микология
изучает микроскопические грибки (эти
микроорганизмы являются эукариотами).

4.
Протозоология
изучает простейшие (клетки которых, как
и у грибков, имеют эукариотический тип
строения).

5.
Вирусология
изучает микроорганизмы, представляющие
собой неклеточную форму жизни – вирусы.


Б. По
прикладным
целям
изучения различают медицинскую,
санитарную, ветеринарную, промышленную,
почвенную, морскую и космическую
микробиологию.

1.
Медицинская
микробиология изучает микроорганизмы,
имеющие медицинское значение. Её задачи
более подробно будут изложены ниже.

2.
Санитарная
микробиология
изучает микробиологические аспекты
безопасности человека. Её изучают на
медико-профилактических
(санитарно-гигиенических) факультетах
медицинских высших учебных заведений.

3.
Ветеринарная
микробиология изучает микроорганизмы,
вызывающие патологические процессы у
животных.

4.
Промышленная
микробиология занимается вопросами
использования микроорганизмов как
источников получения необходимых
веществ в промышленных масштабах.

На
предприятиях микробиологической
промышленности производят антибиотики,
витамины, аминокислоты и другие
биологически активные вещества. Кроме
этого, специалисты промышленной
микробиологии работают в пищевой,
химической и других отраслях производства.

5.
Почвенная
микробиология изучает микроорганизмы,
обитающие в почве. Эти микробы играют
большую роль в жизни растений.


6. Морская
микробиология изучает микроорганизмы
мирового океана.

7.
Космическая
микробиология изучает взаимодействие
человеческого организма с микробами в
условиях космического полёта, а также
занимается поисками микроорганизмов
внеземного происхождения.

Сложные (дифференциальные) методы окраски мазков

Сложные
методы окраски основаны на особенностях
физико-химического строения микробной
клетки. Сущность этих методов заключается
в воздействии на мазок двух красящих
веществ, из которых одно является главной
(основной) краской, а другое –
дополнительной (контрастной).

После
воздействия первой краской мазок
обесцвечивают и только после этого
подвергают дополнительной окраске. В
качестве обесцвечивающих веществ может
быть применен целый ряд химических
реагентов (кислоты, щелочи, спирт, ацетон
и др.).

Промывание мазка простой водой
также является чисто механическим
процессом обесцвечивания, но для этого
необходимо продолжительное время; кроме
того, обесцвечивание получается неполным.

По отношению к обесцвечивающим веществам
можно разбить микробов на группы легко
и трудно обесцвечиваемых. Не все виды
микробов одинаково относятся к
обесцвечивающим реагентам;

некоторые
являются кислото- и спиртоустойчивыми,
другие только кислотоустойчивыми.
Наконец, некоторые, например, споры,
энергично противостоят воздействию
всех обесцвечивающих веществ и относятся
к группе краскоустойчивыx.


Сложные
методы окраски имеют важное
дифференциально-диагностическое
значение для характеристики изучаемого
микроба.

2.1. Типы таксономии биологических объектов

Существует
два основных типа
таксономии
(т.е. систематики или классификации)
биологических объектов – филогенетический
и практический. В последние годы в
систематику микроорганизмов пришли
молекулярные генетики и своими
исследованиями смешали два этих принципа.

Как результат, современная классификация
микробов стала, несомненно, более
научной, но, к сожалению, более путанной.
Кроме этого, она менее удобна для
применения в практической работе –
даже в научных журналах многие авторы
продолжают пользоваться устаревшей
классификацией или совмещать обе
системы;

тем более, что более новые
системы таксономии еще не устоялись и
меняются с калейдоскопической быстротой.
Ниже будут, как правило, приводится
традиционные варианты таксономии
микроорганизмов, любители «передового
рубежа науки» могут почерпнуть нужную
информацию в научной периодике и
монографической литературе.

А.
Филогенетическая
систематика биологических объектов
называется также естественной
систематикой.

1. При
этом типе таксономии биологических
объектов в один таксон
(группу классификации) объединяются
объекты, имеющие общий корень происхождения.
Т.е.

2.
Филогенетическая (естественная)
систематика является основным типом
таксономии, применяемой в общей
биологии.


Б.
Практическая
систематика биологических объектов
называется также искусственной
систематикой.

1. При
этом в один таксон объединяются
биологические объекты, схожие по своим
признакам. Общий принцип такой
классификации можно сформулировать
как «кто
на кого похож».

2.
Практическая (искусственная) систематика
является основным типом таксономии,
применяемой в микробиологии.

Микроорганизмы
классифицируются на основе морфологических,
биохимических, физиологических
(культуральных), серологических и
молекулярно-биологических признаков.

А.
Морфологические
признаки выявляются с помощью
микроскопического метода исследования.
Можно сказать, что описывая морфологию
микроорганизмов, описывают все те
признаки, которые видны в микроскоп.

1.
Морфологические признаки включают в
себя форму,
размер
и строение
бактериальной клетки или вирусной
частицы.

2.
Морфологические признаки используются
и в классификации бактерий
и в классификации вирусов.

Б.
Биохимические
признаки микроорганизмов изучаются в
ходе культурального метода исследования.

1. Под
биохимическими признаками понимают
биохимическую
активность
бактерий (так как вирусы не имеют
собственного метаболизма, то об их
биохимической активности говорить не
приходится). Т.е.


2.
Биохимические признаки используются
в классификации бактерий,
но не вирусов.

В.
Культуральные
(или физиологические) признаки так же
изучаются в ходе культурального метода
исследования.

1. Под
культуральными признаками понимают
характер
роста
микроорганизмов на
искусственных питательных средах.

2.
Культуральные признаки так же используются
лишь в классификации бактерий,
но не вирусов, так как последние не
растут (как облигатные паразиты) на
искусственных питательных средах.

Г.
Серологические
признаки изучаются с помощью
иммунологического метода исследования
(а именно, с помощью серологических
реакций). Эта группа признаков микробов
изучается в курсе иммунологии.

1. Под
серологическими признаками микроорганизма
понимают его антигенный
состав.


2.
Серологические признаки используются
в классификации как бактерий,
так и вирусов.

Д.
Молекулярно-биологические
признаки микроорганизмов выявляются
при генетическом исследовании.

1. К
молекулярно-биологическим признакам
относят особенности строения нуклеиновых
кислот
микроорганизмов.

а. С
помощью специальных методов, о которых
речь пойдёт ниже, в разделе, рассказывающем
о генетике бактерий, изучают строение
ДНК.

методы окраски цитологических мазков

б.
Используют в таксономии микроорганизмов
и особенности строения их РНК.

1.
Структура иРНК
используется для классификации
РНК-геномных вирусов.

2.
У бактерий с таксономической целью
используют особенности 16S
рРНК.
рРНК находится вне сферы действия
отбора, и эволюционируют только в ходе
спонтанных мутаций, скорость которых
постоянна.

2.
Включение молекулярно-биологических
признаков в систематику сближает оба
типа таксономии, так как сходство на
уровне нуклеиновых кислот отражает не
только простое сходство признаков, но
и эволюционную близость сравниваемых
микроорганизмов.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицинский взгляд на еду
Adblock
detector