Новый учебник по цитологии

5. Уплотнение материала.

Проводится для того, чтобы из объекта
можно было приготовить тон­кие срезы.
Выполняется путем заливки в парафин,
целлоидин или целлоидинпарафин. Можно
уплотнить материал и путем замораживания
в жид­ком азоте, что используется в
гистохимии ферментов. При этом сохраняют­ся
интактными все ферменты.

6. Изготовление срезов.

Этот этап выполняется при помощи приборов
МИКРОТОМОВ (рис. 2.8). В них используются
очень острые ножи, которые закрепляются
не­подвижно. Объект, залитый в парафин,
движется вперед в течение каждо­го
цикла (оборота) на определенное расстояние
(3—10 мкм), и с его повер­хности срезаются
срезы такой же толщины (ротационный
микротом).

В микротомах других
конструкций(санные микротомы)
неподвижно закреп­ляется объект,
а нож движется свободно вперед-назад в
горизонтальной плоскости и после каждого
цикла движений опускается на заданную
тол­щину, производя срезы.

7. Удаление из срезов парафина.

Срезы помещаются на предметное стекло,
подсушиваются и помеща­ются в
растворитель парафина — ксилол, толуол,
бензол или в другие ве­щества.

При помощи окрашивания достигается
контрастность препаратов. Для этого
используют красители. В зависимости от
источника получения они подразделяются
на красители животного, растительного
происхождения, синтетические.

новый учебник по цитологии

Примером кислого красителя может служить
эозин, являющийся синтети­ческим
красителем. Пример основного красителя
— гематоксилин. Он по­лучается из
коры некоторых пород деревьев (кампешевое
дерево).

Красители делятся также
на цитоплазматические (окрашивают
цитоп­лазму клетки, например, эозин)
и ядерные (окрашивают ядро, например,
гематоксилин, азур и др.).

1. ОКСИФИЛИЯ — это способность клеток
и тканей окрашиваться кислыми красителями.
Сами структуры при этом имеют основные
свой­ства. Например, эритроциты
обладают оксифилией за счет содержания
в них основного белка гемоглобина.

2. ЭОЗИНОФИЛИЯ (вариант оксифилии) —
способность структур окрашиваться
кислым красителем эозином. Эозинофилией
обладает ци­топлазма многих клеток.

3. АЦИДОФИЛИЯ — то же, что и оксифилия.

4. БАЗОФИЛИЯ — способность структур
окрашиваться основными красителями.
При этом сами структуры должны иметь
кислую реакцию. Например, нуклеиновые
кислоты (ДНК и РНК) обладают базофилией,
т.к.

по химическим законам могут связывать
красители-основания. Благо­даря этому
ядро любой клетки в той или иной степени
базофильно. Базо­филией обладает
также цитоплазма белоксинтезирующих
клеток из-за со­держащейся в
многочисленных рибосомах РНК.

5. ПОЛИХРОМАТОФИЛИЯ — способность
структур клетки окраши­ваться и
кислыми, и основными красителями. Таким
качеством обладают, например, гранулы
нейтрофильных лейкоцитов. Чаще, однако,
в качестве синонима используют термин
НЕЙТРОФИЛИЯ.

6. МЕТАХРОМАЗИЯ — способность
гистологических структур при связывании
красителя изменять его цвет. При этом
сами структуры окра­шиваются в цвет,
который отличается от цвета красителя
в растворе.

7. АРГЕНТОФИЛИЯ — способность структур
окрашиваться солями серебра.

8. ХРОМОФИЛИЯ — способность структур
окрашиваться солями хрома.


9. Заключение, или консервация срезов.

На срез наносят каплю синтетической
среды или канадского бальзама, а затем
покрывают покровным стеклом. После
высыхания бальзама препарат прозрачен,
может быть подвергнут изучению под
микроскопом, спосо­бен долго храниться
и может использоваться как своеобразный
документ.

ОБРАБОТКА ОБЪЕКТОВ ДЛЯ ТРАНСМИССИОННОЙ
ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ

Обработка гистологических объектов
для трансмиссионной электрон­ной
микроскопии в принципе состоит из тех
же этапов, что и описанная выше
гистологическая техника: взятия
материала, его фиксации, заливки,
изготовления срезов и их окрашивания,
или контрастирования.

Эти этапы имеют
свои особенности. Взятый материал не
должен превышать размеры 2 мм (обычно
берут кусочек органа кубической формы
с длиной ребра 1 мм).

Фиксируют полученный
материал в некоторых альдегидах
(глутаральде-гид) с дополнительной
фиксацией (постфиксация) в растворе
четырехоки-си осмия. При постфиксации
происходит одновременное окрашивание
структур.

Заливка материала производится в
синтетические (эпоксидные) смо­лы:
аралдит, эпон и др. Изготовление
ультратонких срезов толщиной 30—50 им
осуществляется на приборе ультратоме
при помощи специаль­ных стеклянных
или алмазных ножей.

При этом вначале на
ультратоме готовят полутонкие срезы,
на которых (после их окраски) в световом
мик­роскопе находят необходимые для
изучения в электронном микроскопе
участки.

Далее производят «заточку»
объекта — удаляют лишние его учас­тки,
оставляя необходимые. Затем готовят
окончательные (ультратонкие) срезы.
Окрашивание (оно называется
контрастированием) осуществляют при
помощи солей тяжелых металлов (урана,
свинца, осмия и др.).

Эти соли в разной
степени связываются со структурами
объекта, что обеспечи­вает различную
электронную плотность (контрастность)
последних. Пос­ле окрашивания
ультратонкие срезы помещают на
металлическую сетку и затем изучают в
электронном микроскопе.

» Для изучения гистологического
объекта в сканирующем электронном
микроскопе его вначале подвергают
фиксации, затем высушивают. Далее на
поверхность объекта напыляют металлы,
такие, например, как золото, с тем, чтобы
они отражали пучок электронов.

4. Функция возбудимости, реактивности, интегративная функция.

КЛАССИФИКАЦИЯ ТКАНЕЙ

Первые классификации тканей, основанные
на микроскопическом изучении строения
и развития, были предложены в середине
XIXвек-,: (А. Гассаль, А.
Келликер, Ф. Лейдиг).


1.1. Пограничные ткани.

1.2. Ткани внутренней среды.

2.1. Ткани мышечной системы.

2.2. Ткани нервной системы. Другим советским
гистологом, Н.Г. Хлопиным, была предложена
ге­нетическая классификация тканей,
т. е. классификация, в основу которой
положены источники развития тканей.
Эта классификация выглядит так.

1. ЭПИТЕЛИЙ

1.1. Эпидермальный тип.

1.2. Энтеродермальный тип.

1.3. Целонефродермальный тип.

1.4. Эпендимоглиальный тип.


1.5. Ангиодермальный тип. 2. СОЕДИНИТЕЛЬНАЯ
ТКАНЬ И КРОВЬ

2.1. Соединительная ткань и лейкоциты.

2.2. Эритроциты.

2.3. Хорда и хордальный хрящ.

2.4. Мезенхима.


3. МЫШЕЧНАЯ ТКАНЬ

3.1. Миокард.

3.2. Мезенхимальная гладкая мышечная
ткань.

3.3. Соматическая миотомная мышечная
ткань.

3.4. Мионейральная ткань.

3.5. Миоэнидермальиая ткань.


4. НЕРВНАЯ ТКАНЬ Нейроны, нейроглия.

Классификация Н.Г. Хлопина вскрывает
гистогенетические связи между
функционально и структурно различающимися
тканями. Наиболь­шее распространение
получили гистогенетические классификации
эпите­лиальных и мышечных тканей.

РАЗВИТИЕ ТКАНЕЙ В ЭВОЛЮЦИИ

В ходе эволюции происходило возникновение,
развитие и усложнение строения различных
тканей. Ход эволюции тканей наиболее
полно объяс­няют следующие теории.

Теория параллельных рядов. А.А.
Заварзин разработал теорию эво­люции
тканей, которая называется теориейпараллельных рядов тканевой эволюции,
илитеорией параллелизма.

Суть
этой теории заключается в том, что в
ходе эволюции в разных ветвях
филогенетического дерева са­мостоятельно,
независимо, параллельно возникали
одинаково построен­ные ткани,
выполняющие сходные функции.

Например,
соединительная ткань ланцетника и
млекопитающих выполняет одинаковые
функции и поэтому имеет общие черты
строения. Теория параллельных рядов
хоро­шо раскрывает причины эволюции
тканей, а также возможности их адаптации.

Теория дивергентного развития
тканей. Н.Г. Хлопин предложил
соб­ственную оригинальную теорию
эволюции тканей, которая называетсяте­орией дивергентного развития
тканей.

Согласно этой теории, ткани
в эво­люции и онтогенезе развиваются
дивергентно, то есть возникают из уже
существующих тканей путем расхождения
признаков, что ведет ко все воз­растающему
разнообразию тканей.

Новый учебник по цитологии

Эта теория
показывает, как в ходе ди­вергенции
из одного эмбрионального зачатка
образуются ткани, постепен­но
приобретающие все более выраженные
различия в строении и функци­ях.

Например, развивающиеся из кожной
эктодермы эпидермис и много­слойный
плоский эпителий имеют больше сходств,
чем различий, тогда как имеющие общий
с ними источник развития эпителий
аденогипофиза, эмаль зуба и др. разительно
от них отличаются.

Единая концепция эволюционного
развития тканей. Теории А. Заварзина
и Н.Г. Хлопина органично дополняют друг
друга. Поэтому сои

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицинский взгляд на еду
Adblock
detector