Правила забора жидкостной цитологии

Назначение

Используется для диагностики in vitro.

Метод представляет собой процесс приготовления клеточных препаратов на жидкой основе. Он призван заменить традиционный метод приготовления микропрепаратов мазков по Папаниколау, применяющихся в скрининговых исследованиях для выявления рака шейки матки.

Средой для сбора и транспортировки гинекологических образцов, тестируемых в анализах амплифицированных ДНК BD ProbeTec™ Chlamydia trachomatis (CT) QI и Neisseria gonorrhoeae (NG) QI, является жидкий консервант SurePath® Preservative Fluid.

Инструкция по использованию SurePath® Preservative Fluid для подготовки образцов, используемых в этих анализах, см. на листках-вкладышах в упаковках наборов для анализа.

Чем является?

Это инновация в сфере обследования женских половых органов на атипичные клетки. Цитология с латинского раскладывается, как «цито»-клетка, «логи»-исследовать.

Название говорит само за себя. При заборе анализа обследуют строение клеток. Такой тест дает минимум ложно — положительных либо ложно -отрицательных ответов.

Благодаря цитологии было спасено немало жизней. Ведь именно этот анализ позволяет на начальном этапе определить, что у женщины развиваются атипичные клетки. А чем раньше обнаружат рак, тем выше вероятность того, что его излечат.

Поговорим о приставке «жидкостная». После забора материала образцы отправляют в жидкую среду. Далее образцы отправляют в специальную центрифугу, где все клетки отделяются ровным слоем.

Этот слой кладут на стекло и начинают обследование под микроскопом. Данный метод цитологии шейки матки при помощи жидкости дает высокий результат по сравнению с тем, когда биоматериал сразу кладут на стекло, не отправляя в центрифугу.

Краткий обзор и описание

Скрининговое исследование для выявления рака шейки матки с использованием метода Папаниколау (Pap) включает микроскопическое исследование экто- и эндоцервикальных клеточных образцов, нанесённых на предметные стёкла и окрашенных по методу Папаниколау.

Цервикальное цитологическое скрининговое исследование с помощью мазка по Папаниколау позволило сократить уровень смертности от инвазивной карциномы шейки матки на 50-70%.

Правила забора жидкостной цитологии

Поскольку цервикальное цитологическое исследование представляет собой скрининговое исследование, все обнаруженные патологии должны подтверждаться гистологическим исследованием.

Для точности диагноза по мазкам Папаниколау крайне важно соблюдать процедуры отбора и приготовления образцов. Для полной точности чрезвычайно важна рандомизация и равномерный отбор части образца.

Традиционная процедура взятия мазка по Папаниколау не предусматривает перемешивания образца перед приготовлением микропрепарата. Поскольку клетки на устройстве для взятия проб погружены в слизь, те клетки, которые переносят на микропрепарат, могут не быть репрезентативной выборкой всех клеток взятого мазка.

Клетки переносятся на предметное стекло в зависимости от того, в каком месте устройства для взятия проб они находились. Много клеток остаётся на устройстве для забора проб.

Неоднородность типичного образца цервикального мазка ведёт к тому, что мазки, приготовленные традиционным способом, трудно готовить, исследовать и интерпретировать.

Часто большие области микропрепаратов, приготовленных традиционным способом, покрыты примесями, клетками воспаления и пластинами эпителиальных клеток, которые могут скрывать ценный диагностический материал.

Кроме того, если мазок не зафиксирован немедленно после приготовления, клеточная морфология может исказиться по мере высыхания (воздушные артефакты).

Описываемый метод представляет собой метод для превращения жидкой суспензии взятого мазка цервикальных клеток в равномерно окрашенный гомогенный микропрепарат SurePath® без разрушения скоплений клеток, необходимых для диагностики.

Процесс включает консервацию клеток, их рандомизацию, обогащение диагностического материала, пипетирование и осаждение для создания клеточного препарата.

Полученный в результате этого процесса микропрепарат может использоваться для обычного цитологического скринингового исследования и категоризации по классификации Бетесда.

Современные методы цитологического скрининга шейки матки

Как и все в этом мире, цитология жидкостная шейки матки имеет положительные и отрицательные стороны. Конечно, данный метод обладает высокой информативность, по сравнению с обычным анализом на цитологию.

«За» жидкостной цитологии «Против» жидкостной цитологии
1)    Биоматериал, взятый из шейки матки, отлично очищен от примесей (кровь, эпителий) благодаря центрифуге. Конечный результат выходит чистый, и исследование дает высокий результат. 1)    Иногда примеси содержат важную информацию о здоровье женщины. Поэтому полное их удаление возможно смажет картину конечного результата.
2)    Данное исследование обладает повышенной чувствительностью к развивающейся атипии на шейке матки. 2)    Из-за агрессивной обработки биоматериала некоторые клетки могут деформироваться.
3)    При жидкостной цитологии есть возможность длительного хранения забранного материала в специальной жидкости. Более того, из этого материала можно сделать еще несколько повторных исследований.  3) Длительное хранение требует дорогостоящих аппаратов, поэтому не все клиники в состоянии позволить себе этот метод исследования.
4)    Забранный материал при помощи данной методики можно применить не только для цитологии, но и для исследований на другие заболевания, например, ВПЧ.

Как видим, плюсов значительно больше у данного исследования шейки матки, нежели минусов.

Согласно статистике, за последние 10 лет количество онкологических заболеваний в России увеличилось на 25,5%. Рак шейки матки в списке лидирующих онкологических заболеваний.

Онкологическая патология шейки матки развивается постепенно из предшествующих поражений, поэтому существует реальная возможность предотвращения рака путем диагностики и лечения этих поражений-предшественников (рис.1).

На сегодняшний день рак шейки матки — это та патология, развитие которой действительно можно предотвратить, для этого необходимо по крайней мере 1 раз в год посещать акушера-гинеколога.

Наибольшее количество цервикальных поражений, в том числе и тяжелых, приходится на ранний репродуктивный возраст. Поэтому проведение исследования шейки матки необходимо начинать как можно раньше: с 18 лет или с возраста начала половой жизни.

Основной метод поиска патологии шейки матки — цитологический, то есть исследование клеточных мазков с поверхности шейки матки (Пап-тест). С помощью специального шпателя или щеточки врач собирает клетки с поверхности шейки матки и из цервикального канала, наносит этот материал на предметное стекло, затем в лаборатории мазок окрашивают и исследуют под микроскопом.

Цитологическое исследование безболезненно, доступно любой женщине, требует небольших финансовых затрат, и, самое главное, позволяет врачу диагностировать злокачественный процесс в начальной стадии.

Цитологический скрининг признан классическим методом и рекомендован ВОЗ для проведения в масштабах национальных программ. Однако наряду с явными «плюсами» цитологическое исследование имеет и существенные недостатки, которые могут затруднить работу врача и задержать своевременное лечение.

Информативность цитологического метода зависит от уровня подготовки специалистов, а также качества забора материала для цитологического исследования, так как неправильный забор материала повышает частоту ложноотрицательных результатов.

Мазок может получиться слишком толстым (рис.2) или тонким, может быть загрязнен элементами крови, элементами воспаления, спермицидными и антибактериальными кремами, которыми женщина пользовалась в ближайшее время.

Врач может плохо распределить клеточный материал на стекле или плохо окрасить мазок. В результате подобных ошибок определенная часть женщин с цервикальным раком имеет в прошлом «хорошие» мазки перед развитием онкологической патологии.

Основным путем повышения достоверности цитологического метода исследования является использование метода “жидкостной цитологии”. Врач собирает клетки с поверхности шейки матки и из цервикального канала с помощью специальной щеточки и вместе со съемной щеточкой помещает во флакон со стабилизирующим раствором, который “консервирует” собранный клеточный материал, препятствует повреждению клеток, позволяет избежать бактериального загрязнения и в оптимальных условиях доставить собранные клетки в лабораторию.

Помимо этого материал, полученный методом “жидкостной цитологии”, устойчив к колебаниям температуры, хранится в течение нескольких месяцев и может быть использован для проведения дополнительных или контрольных исследований.

После поступления флакона с материалом в лабораторию проводят его обработку, выполняя несколько операций: смывание клеток с щеточки инструмента и получение суспензии клеток в специальной среде со стабилизацией клеток, разрушением белка, удалением слизи, разрушением эритроцитов и фиксацией “в объеме”.

Далее следуют мероприятия регулирующие плотность клеток на стекле (концентрирование или разведение). Препарат получается тонкослойным (клетки на стекле расположены в один слой (рис.3)).

Экспертами ВОЗ подсчитано, что скрининг женщин в возрасте 25–64 лет с интервалом в 5 лет может привести к снижению смертности от рака шейки матки на 84%.

Правила забора жидкостной цитологии

В Многопрофильной клинике ТюмГМА проводится цитологическое исследование соскоба шейки матки и цервикального канала как классическим ПАП-методом (№ в прейскуранте 14027, стоимость – 255 рублей), так и методом «жидкостной цитологии» ((№ в прейскуранте 14034, стоимость 500 рублей).

Более подробную информацию о заболевании вы можете получить на сайте Европейского общества рака шейки матки //www. ecca. info/ru/cervical-cancer. html.

Лабораторией Многопрофильной клиники ТюмГМА, к. м.н.

//mybiblioteka. su/11-29814.html

//analizy. vse-zabolevaniya. ru/citologicheskij-metod/

//klinika. tyumsmu. ru/sovremennyie-metodyi-czitologicheskogo-skrininga-shejki-matki. html

Принципы методики

Метод жидкостной цитологии представляет собой процесс приготовления клеточных препаратов цервикальных клеток на жидкой основе.

Гинекологические образцы собираются квалифицированным медицинским персоналом с помощью приспособления типа «метёлка» (например, Cervex Brush®) или эндоцервикального комбинированного устройства типа щёточки-шпателя (например, Cytobrush® Plus GT или Pap Perfect® компании MedScand (USA) Inc.

) со съёмными головками. Головку устройства снимают с ручки и помещают во флакон с жидким консервантом SurePath® Preservative Fluid. Флакон закрывают пробкой, прикрепляют этикетку и отправляют в сопровождении соответствующих  документов в лабораторию для обработки.

В лаборатории законсервированный образец перемешивают путём встряхивания, а затем переносят в пробирку с PrepStain® Density Reagent (плотным реагентом).

Стадия обогащения, состоящая из осаждения препарата на центрифуге через плотный реагент, частично удаляет из препарата ненужные для диагностики примеси и избыточные клетки воспаления.

После центрифугирования пробирку с обогащённым клеточным компонентом восстанавливают деионизированной водой, и клеточный материал ресуспендируют с помощью пипеточного дозатора путём последовательного отбора и выпуска жидкости.

Затем материал образца переносится в PrepStain® Settling Chamber (осадочную камеру), помещённую на предметное стекло SurePath® PreCoat. Клетки осаждаются под действием силы тяжести в течение короткого периода инкубации.

Избыточный материал сливают. Микропрепарат SurePath® PreCoat окрашивают, осветляют и накрывают покровным стеклом. Клетки располагаются в круге диаметром 13 мм.

· Материал для мазка берут перед бимануальным исследованием;

· Сначала проводят забор материала для цитологического исследования, а потом — для выявления возбудителей инфекций, передающихся половым путём;

· При обильных выделениях из половых путей перед исследованием их удаляют большим тампоном;

· Сначала берут соскоб с шейки матки, а потом из цервикального канала;

· Допустимо два образца (с экзоцервикса и эндоцервикса) наносить на одно стекло;

· Небольшие кровянистые выделения не влияют на результат цитологического исследования, но при обильном кровотечении забор материала следует отложить.

Полученный материал равномерно распределяют тонким слоем по специально обработанному обезжиренному предметному стеклу, чтобы не было комков, и немедленно фиксируют, пока мазок еще не высох, смесью эфир/96% этиловый спирт или только 96% этиловым спиртом.

При использовании фиксирующих аэрозолей головку распылителя следует держать на расстоянии не менее 25 см от предметного стекла, чтобы не нарушить расположение клеток.

Забор материала для исследования на р16 (жидкостная цитология)

Забор материала рекомендуется производить при помощи одноразовой цервикальной щеточки (cervix-brush). Конус щеточки осторожно направляется в цервикальный канал.

После введения в него конуса остальная часть щеточки прижимается к поверхности эктоцервикса, и производится 5 полных круговых вращений — три по часовой стрелке и два — против часовой стрелки.

Перед проведением данных манипуляций необходимо тщательно очистить шейку матки от слизи. Это чрезвычайно важно, так как слизь в дальнейшем затрудняет интерпретацию результатов иммуноцитохимического окрашивания.

Щеточку с материалом необходимо опустить в контейнер с жидкой транспортной средой и тщательно ополоснуть ее там. При этом нужно стараться, чтобы «щетинки» cervix-brushполностью погружались в раствор.

Щеточка cervix-brush позволяет забирать клеточный материал не только с эктоцервикса, но и с расположенной в области наружного зева зоны трансформации и в большинстве случаев с наружной трети цервикального канала.

Поэтому при скрининговом исследовании (т. е. когда нет подозрения на патологию шейки матки) можно ограничиться использованием щеточки cervix-brush. Если врач считает, что требуется более тщательный забор материала с эндоцекрвикса, то можно дополнительно воспользоваться щеточкой типа цито — brush.

· до этого методом привычной цитологии уже была диагностирована дисплазия;

· пациентка в прошлом проходила лечение от дисплазии;

· имеются жалобы на ациклические либо контактные кровомазания;

· пациентка в прошлом перенесла конизацию или диатермокоагуляцию шейки матки;

· если при кольпоскопии анияого методом привычной цитологии уже была диагностирована дисплазэлементы аномальной зоны трансформации уходят в цервикальный канал, и стык эпителиев не визуализируется.

Бывают случаи, когда у пожилых пациенток суженный или атрезированный наружный зев не пропускает мягкие ворсинки конуса Cervix-brush. Тогда мы рекомендуем взять щеточкой Cervix-brush материал только с эктоцервикса, так как вы бы это сделали шпателем, но, совершив большее число разнообразных движений по эктоцервиксу, так чтобы все ворсинки щеточки были задействованы.

Затем следует попытаться получить мазок с эндоцервикса щеточкой цито-brush, которую легче провести в суженный цервикальный канал. Если пройти за наружный зев не удается, то пометьте в направлении и амбулаторной карте, что наружный зев атрезирован и мазок с эндоцервикса не получен.

Показания

Что такое жидкостная цитология? Это современный инновационный вариант цитологического исследования, с помощью которого диагностируются новообразования шейки матки.

Именно этот метод позволяет выявить злокачественную опухоль или предраковое состояние на самых ранних стадиях. Благодаря этому шансы на полнейшее выздоровление увеличиваются в несколько раз.

Суть метода жидкостной цитологии заключается в том, биологический материал помещают не на стекло, а в жидкую среду.

Специальной щеточкой производят соскоб из трех зон шейки: поверхность влагалищной части, шеечный канал, переходная зона. Биоматериал погружают в жидкость.

В лаборатории материал извлекают из пробирки с жидкой средой, клетки эпителия отмывают от различных примесей, слизи и других выделений, обогащают и наносят на предметные стекла, исследуют под микроскопом.

Затем проводят классический ПАП-тест, а при необходимости жидкостная цитология позволяет выполнить и иммуногистохимические тесты, например, поиск онкомаркера шейки матки р16.

Такой способ значительно повышает точность диагноза. Клетки шеечного отдела, пораженные дисплазией 2 и 3 степени или раком, активно продуцируют белок р16, при этом анализ ПЦР на ВПЧ может быть и отрицательным, что затрудняет диагностику. Жидкостная цитология расширяет рамки современной диагностики.

Согласно статистическим данным, классический ПАП-тест при наличии предрака дает ложноотрицательный результат в 15 – 50% случаев. Это обусловлено методикой выполнения теста, что ведет к маскировке предраковой атипии под воспалительную.

правила забора жидкостной цитологии

Такой способ позволяет получить максимально «чистую» культуру клеток, благодаря чему в дальнейшем ставится наиболее точный и развернутый диагноз. С помощью жидкостной цитологии можно не только уточнить наличие или отсутствие клеток злокачественной природы, но и определить стадию заболевания.

Основными показаниями для проведения жидкостной цитологии являются:

  • наличие эрозии шейки матки.
  • очаги лейкоплакии, эритроплакии;
  • кондиломы шейки матки;
  • кисты;
  • контроль после лечения;
  • профилактическое обследование;
  • в рамках обследования на ИППП;
  • бесплодие;
  • длительный прием противозачаточных или гормональных средств;
  • наступление менопаузы.

Жидкостную цитологию рекомендуется проводить приблизительно один раз в год, так же, как и посещать гинеколога для профилактического осмотра.

Главный показатель забора материала с шейки матки для цитологии это подозрение на онкозаболевание. Результатом теста будет показатель присутствия раковых клеток и степень их развития.

В первую очередь обследуют женщин, которые находятся в группе риска заболеваний раком. Помимо этого фактора есть еще ряд ситуаций, при которых показан этот анализ.

  • Планирование родить ребенка;
  • Различные сбои в течение менструального цикла (ранние менструации, задерживающиеся, обильные кровотечения);
  • Невозможность забеременеть;
  • Количество половых партнеров превышает одного;
  • Вирусные заболевания;
  • Длительный срок приема гормональных контрацептивов;
  • Влагалищные выделения не ясной этиологии;
  • Предварительные меры перед введением внутриматочной спирали.

Данный тест следует проходить всем женщинам, живущим половой жизнью, в возрасте от 18 до 65 лет. Даже если у женщины наступил период менопаузы, ведь в это время большой риск заболеть онкологическими заболеваниями.

Ограничения

  • Гинекологические образцы для приготовления препаратов, получаемых с помощью ручного метода, должны собираться с помощью одобренного устройства типа «метёлка» в соответствии со стандартной процедурой взятия мазка, определённой производителем.
  • Приготовлением и исследованием препаратов TriPath Imaging®, Inc. на жидкой основе могут заниматься только лица, прошедшие обучение в компании TriPath  или иных организациях, уполномоченных компанией TriPath  на проведение подобного обучения.
  • Для обеспечения требуемой эффективности устройства следует использовать только материалы, поставляемые или рекомендуемые компанией TriPath Imaging®, Inc. Использованные материалы должны быть надлежащим образом утилизированы в соответствии с нормативами организации и действующим законодательством.
  • Все материалы предназначены для одноразового использования и не могут быть использованы повторно.
  • Для выполнения цитологического исследования SurePath® на жидкостной основе требуется 8,0±0,5 мл образца, собранного в SurePath® Preservative Fluid Collection Vial (флакон для забора мазка с жидким консервантом).

Подготовка к анализу

Материал из шейки матки для жидкостной цитологии забирают довольно быстро. Процедура проходит в гинекологическом кабинете, когда пациентка находится на специальном кресле.

Забор происходит безболезненно. За 2 часа пациентке следует перестать мочиться. Кроме этого, анализ не берут во время месячных, воспаления и других выделений из влагалища.

Воздержаться перед тестом от:

  • Секса в течение 2 суток до анализа;
  • Спринцевания;
  • Использования свечей и смазок;
  • Употребления таблеток и противозачаточных средств;
  • Использования тампонов.

Если все требования соблюдены, тогда доктор промакивает шейку матки тампоном из ваты, а далее при помощи щеточки делает забор биоматериала. После помещает его в специальную жидкую среду и отправляет в лабораторию для изучения. Ответ на тест обычно приходит через 10 дней.

Предупреждения

  • Жидкий консервант SurePath® Preservative Fluid содержит водный раствор денатурированного этилового спирта и не предназначен для употребления внутрь. Смесь содержит небольшие доли метилового и изопропилового спиртов, которые при приёме внутрь могут быть опасны для здоровья и привести к слепоте.
  • Плотный реагент PrepStain® Density Reagent содержит азид натрия. Азид натрия может реагировать с медными и свинцовыми трубами, образуя высоковзрывчатые азиды металлов. При утилизации смойте большим количеством воды, чтобы предотвратить накопление азида.

Техника проведения

После того, как доктор произвел забор с шейки матки специальной щеточкой, биоматериал отправляется в капсулу с жидкостью и передают на обследование в лабораторию. Там происходит исследование при помощи специального оборудования.

Аппарат для жидкостной цитологии являет собой процессор, который работает на основании установленной программы. На стекло-слайд лаборант наносит биоматериал.

Прежде чем начать жидкостную цитологию весь материал побывает в центрифуге. Там основные клетки отделятся от примесей, и материал будет доступен для скрупулезного изучения на присутствие атипичных клеток.

Поэтому, для того, чтобы провести жидкостную цитологию шейки матки понадобятся такие инструменты:

  • Гинекологическое кресло;
  • Зеркало;
  • Особая щеточка;
  • Капсула с жидкостью, куда опускается щеточка;
  • Запрограммированный аппарат для исследования.

Все эти инструменты изображены на картинке ниже.

Рассмотрим процесс проведения жидкостной цитологии по шагам, которые будет предпринимать доктор.

  1. Женщина оголяется ниже пояса и занимает удобное положение на гинекологическом кресле.
  2. Доктор использует зеркало, чтобы открыть доступ к шейке матки.
  3. Настраивает колькоскоп, чтобы хорошо рассмотреть шейку.
  4. В цервикальный канал вводится специальная щеточка на длину 1,5-2 см. Забранный материал переносится на лабораторное стекло и помечается маркером.
  5. Далее доктор берет специальный шпателек Эйра, чтобы взять эпителий с шейки матки. Этот образец так же укладывается на стекло и помечается маркером.
  6. Если есть подозрительные участки на шейке матки, тогда делается соскоб и с них. Его так же помещают на стекло и маркируют.
  7. При жидкостной цитологии доктор все мазки отправит в капсулу с жидкостью, а потом лаборант после очищения отправит материал на стекло.
  8. В лаборатории материал исследуют на специальном аппарате, который запрограммирован для обнаружения атипичных клеток.
  9. Образец очищают от примесей: крови, слизи, спермы и отправляют на стекло.

Иногда женщину просят пересдать мазок. Однако при выполнении жидкостной цитологии данная просьба возникает довольно редко.

Меры предосторожности

  • Следует соблюдать указания по надлежащей лабораторной практике, а также все процедуры, рекомендованные при использовании метода жидкостной цитологии.
  • Все реагенты стабильны до истечения указанного срока годности при условии соблюдения рекомендованных условий хранения.
  • Бактериальная контаминация реагентов может привести к неправильным результатам.
  • Замена предметных стёкол SurePath® PreCoat на другие может привести к неоптимальным результатам.
  • Избегайте расплёскивания и распыления жидкостей. Используйте соответствующие средства защиты рук и глаз, а также защитную одежду.
  • Жидкий консервант SurePath® Preservative Fluid обладает бактерицидным действием и был проверен на действие против следующих микробов: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans, Mycobacterium tuberculosis и Aspergillus niger. Однако следует постоянно соблюдать универсальные меры предосторожности по обращению с биологическими жидкостями.

Отбор дополнительной аликвоты

Во флаконе для забора мазка с жидким консервантом доступен объём, достаточный для отбора до 0,5 мл однородной смеси клеток и жидкости для дополнительного тестирования перед выполнением теста SurePath® Pap (теста по Папаниколау). Оставшийся после отбора объём достаточен для теста по Папаниколау.

Несмотря на отсутствие свидетельств о влиянии отбора аликвоты из флакона для забора мазка с жидким консервантом на качество образца для цитологического исследования, в редких случаях в ходе этого процесса возможно неравномерное распределение соответствующего диагностического материала.

Если результаты исследования не соответствуют истории болезни пациента, медицинским работникам может потребоваться забор нового образца. Более того, цитологическое исследование решает клинические задачи, отличные от тестирования на заболевания, передающиеся половым путём (ЗППП), таким образом, отбор аликвоты может быть неприемлемым для некоторых клинических ситуаций.

При необходимости можно отобрать отдельный образец для тестирования на ЗППП вместо отбора аликвоты из флакона для забора мазка с жидким консервантом.

При отборе аликвоты из образцов с низкой насыщенностью клетками в SurePath® Preservative Fluid Collection Vial может остаться объём материала, недостаточный для выполнения теста SurePath® Pap (теста по Папаниколау).

Аликвоту следует отбирать перед выполнением теста SurePath® Pap. Допускается отбор только одной аликвоты из флакона для забора мазка с жидким консервантом до выполнения теста по Папаниколау, независимо от объёма аликвоты.

Методика

  1. Для обеспечения однородности смеси необходимо встряхивать флакон для забора мазка с жидким консервантом в течение 10-20 с. Затем в течение одной минуты следует отобрать аликвоту 0,5 мл.
  2. Наконечник пипетки для отбора аликвоты должен иметь аэрозольный барьер, а объём пипетки должен соответствовать объёму отбираемой аликвоты.
    Примечание. Не следует использовать серологические пипетки. Во избежание попадания загрязнений в SurePath® Preservative Fluid Collection Vial или в аликвоту необходимо соблюдать требования надлежащей лабораторной практики. Отбор аликвоты должен выполняться в соответствующем месте за пределами помещения, в котором выполняется амплификация.
  3. Визуально проверьте материал аликвоты в пипетке на наличие крупных твёрдых или полутвёрдых частиц. При обнаружении таких примесей в ходе забора аликвоты следует немедленно вернуть всю отобранную жидкость во флакон с образцом и отбраковать образец для дополнительного тестирования перед тестом по Папаниколау.
  4. Инструкции по обработке аликвоты в анализах амплифицированных ДНК BD ProbeTec™ CT QI и GC QI см. на листках-вкладышах в упаковках наборов для анализа, предоставленных их производителями.

Расшифровка результатов

Расшифровка результатов проведения жидкостной цитологии осуществляется только высококвалифицированным гинекологом или онкологом. Обычно спустя несколько дней, данные из лаборатории попадают к врачу.

Итоги исследования могут иметь как отрицательный, так и положительный результат. В первом случае это говорит о том, что в эпителии шейки матки не происходит никаких злокачественных процессов.

Если же в результате жидкостной цитологии были получены положительные результаты, это говорит о наличии атипичных клеток. Лаборант устанавливает степень заболевания, особенности и видоизменения клеток.

Стадия болезни устанавливается в соответствии с международными классификациями по ВОЗ (CIN1, CIN2, CIN3) и по Бетесда (ASCUS, LSIL, HSIL).

Выделяют несколько типов полученных результатов:

  • патологические изменения клеток не обнаружены, мазок в норме (NILM);
  • имеется несколько аномальных клеток. Это может свидетельствовать о протекающем в организме женщины воспалительном процессе – воспалительный мазок;
  • незначительные атипические изменения в одном слое эпителия (CIN1 или ASCUS);
  • атипичные клетки поражают две трети эпителиального слоя (CIN2 или LSIL);
  • эпителиальные клетки поражены во всех его слоях, атипичные клетки расположены вплоть до базальной мембраны, множественные митозы, изменение ядерно-цитоплазматического отношения, многоядерные клетки (CIN3 или HSIL). Следующей стадией является инвазивный рак.

В качестве дополнительных исследований может быть назначена кольпоскопия, повторное проведение жидкостной цитологии. Обязательным считается выполнение ПЦР анализа мазка на наличие вируса папилломы человека, а также бак посев выделений из влагалища.

При расшифровке результатов врач должен принимать во внимание объем материала, взятого для жидкостной цитологии, период менструального цикла, в котором находится женщина, а также прием различных медикаментов, которые могли исказить результаты исследования.

Жидкостная цитология разрешает определить различные патологии даже на начальных стадиях. Ниже приведены расшифрованные значения анализа.

Выделяют пять уровней развития болезни. На результате они описаны цифрами1-5.

  1. Клетки в норме, патологий нет.
  2. Эта стадия характеризует возможное воспаление в шейки матки. После этого женщину направляют на дополнительное исследование.
  3. В отдельных клетках выявлены изменения. Рекомендуют сделать цитологию еще раз.
  4. Видоизменения в клетках свидетельствуют о предраковом состоянии шейки матки.
  5. Высокий показатель атипичных клеток. Это говорит о первой стадии рака.

При дешифровке жидкостной цитологии используют аббревиатуру.

  • ASC-US. Модификация плоских клеток эпителия.
  • AGC. Показатель воспалений во влагалище.
  • LSIL. Атипичные видоизменения в клетках, которые не свидетельствуют о раке.
  • ASC-H. Подтверждает дисплазию или предраковое положение.
  • HSIL. Эта аббревиатура говорит об онкологии.
  • AIS. Рак.

Необходимые материалы

  • SurePath® Preservative Fluid Collection Vial (флакон для забора мазка с жидким консервантом)
  • PrepStain® Density Reagent (плотный реагент)
  • PrepStain® Settling Chambers (осадочные камеры)
  • SurePath® PreCoat Slides (предметные стёкла PreCoat)
  • Центрифужные пробирки
  • PrepStain® Syringing Pipettes (шприц-пипетки)
  • Наконечники аспиратора
  • Центрифуга
  • Штативы для микропрепаратов
  • Модульный аспиратор (необязательно)
  • Лоток для обработки (необязательно)
  • Приспособление типа «метёлка» или эндоцервикальное комбинированное устройство типа щёточки-шпателя со съёмной головкой (головками) для взятия мазка
  • Устройство для встряхивания
  • Точные пипетки со съёмными наконечниками
  • Деионизированная вода (pH 7,5-8,5)
  • Изопропиловый спирт и химически чистый этиловый спирт
  • Реагенты для окрашивания
  • Осветляющее средство, среда для заливки и покровные стёкла

Важно: отправляемый материал должен быть из одной локализации.

Взятие материала для цитологического исследования может производиться несколькими методами. Рассмотрим два из них: метод внутриигольной пункционной биопсии и изготовление мазка-отпечатка.

Хранение

  • Жидкий консервант SurePath® Preservative Fluid без цитологических образцов может храниться при комнатной температуре (от 15 до 30 ºС) до 36 месяцев со дня изготовления.
  • Срок хранения SurePath® Preservative Fluid с цитологическими образцами – до 6 месяцев в холодильнике (от 2 до 10 ºС) или 4 недели при комнатной температуре (от 15 до 30 ºС).
  • SurePath® Preservative Fluid, содержащий цитологический образец для использования в анализах амплифицированных ДНК BD ProbeTec™ CT QI и GC QI может храниться и транспортироваться до 30 дней при температуре от 2 до 30 ºС перед переносом в пробирки для разбавления образца с целью проведения цитологических исследований на жидкостной основе анализах амплифицированных ДНК BD ProbeTec™ QI.

Стоимость

Цена этого исследования зависит от места проведения анализа и способа его проведения. Ниже приведены три центра, в которых производят жидкостную цитологию шейки матки.

Название центра Цена
Синево 1695 рублей
Инвитро 1445 рублей
ЦЭЛТ Москва 2000 рублей

Итак, жидкостная цитология материала из шейки матки – это наиболее информативный способ обследования женского здоровья на присутствие онкологии, ведь чувствительность анализа достигает 95%!

Процедуры

  1. После взятия мазка с помощью Cervex-Brush® компании Rovers или аналогичного устройства для взятия мазка снимите головку устройства с ручки и поместите во флакон с жидким консервантом. Закройте флакон пробкой, прикрепите этикетку и отправьте в лабораторию.
  2. После регистрации флаконов с образцами в лаборатории поместите каждый флакон в штатив для обработки в комплекте с маркированной центрифужной пробиркой, в которую заранее помещено 4 мл плотного реагента PrepStain® Density Reagent и маркированного SurePath® PreCoat Slides (микропрепарата PreCoat). Плотный реагент следует добавить в пробирку до того, как туда будет добавлен образец, иначе качество процедуры снизится.
  3. Энергично встряхните каждый флакон с образцом в течение 10-20 секунд.
    (Во флаконе для забора мазка с жидким консервантом доступен объём, достаточный для отбора до 0,5 мл однородной смеси клеток и жидкости для дополнительного тестирования. Оставшийся после отбора объём достаточен для теста по Папаниколау. Отбор аликвоты может производиться после встряхивания в ходе теста с жидким консервантом SurePath®.)
    – Перенесите образец с помощью дополнительного автоматического устройства PrepMate™ Automated Accessory и шприц-пипеток PrepStain® Syringing Pipettes. См. инструкции в руководстве по эксплуатации устройств PrepMate.
  4. Поместите пробирки в штативы центрифуги в порядке, указанном на диаграмме последовательности расположения в руководстве по эксплуатации (каждый штатив вмешает до 12 пробирок). Последовательность размещения пробирок очень важна. Должен соблюдаться баланс.
  5. При необходимости сбалансируйте центрифужные пробирки добавлением консервирующей жидкости и центрифугируйте образцы в течение 2 минут при 200 g.
  6. При использовании модульного аспиратора включите систему Easy Aspirator и установите давление 230±50 мм рт. ст. Наденьте на аспиратор системы Easy Aspirator чистые наконечники.
  7. Извлеките штативы центрифужных пробирок из центрифуги. Медленно опустите наконечники системы Easy Aspirator (или одноразовые пипетки для переноса) в центрифужные пробирки для удаления надосадочной фракции. По завершении устройство аспирации должно касаться верха пробирки. Между образцами промывайте наконечники аспиратора водой.
  8. Центрифугируйте пробирки в течение 10 минут при 800 g, чтобы сконцентрировать диагностический компонент в клеточный осадок на дне пробирки.
  9. Извлеките штатив с пробирками из центрифуги. Осторожно и быстро слейте жидкость в раковину. Держа штатив перевёрнутым, осторожно промокните пробирки фильтровальной бумагой так, чтобы клеточный осадок остался в пробирке.
  10. Пометьте предметное стекло PreCoat номером каждого образца, стараясь не касаться поверхности стекла. Поместите предметные стёкла в штатив и установите на каждое предметное стекло осадочную камеру. Положение каждого нумерованного предметного стекла PreCoat должно соответствовать положению соответствующей центрифужной пробирки.
  11. Добавьте 4 мл буферной деионизированной воды (pH 7,5-8,0) в каждую пробирку и хорошо перемешайте встряхиванием.
  12. Обрабатывая пробирки с образцами по одной, перемешивайте их встряхиванием и немедленно перенесите 800 мкл клеточной суспензии в соответственно пронумерованную осадочную камеру на предметном стекле PreCoat. Повторите операцию для каждого образца.
  13. Подождите 10 минут, чтобы произошло полное осаждение. После осаждения осторожно переверните лотки с предметными стёклами над раковиной, чтобы слить оставшуюся жидкость, и промокните лишнюю жидкость фильтровальной бумагой.
  14. Промойте каждую осадочную камеру 500 мкл денатурированного этилового спирта слейте жидкость. Повторите промывание спиртом, слейте лишнюю жидкость и промокните фильтровальной бумагой, держа образцы перевёрнутыми не менее 1 минуты.
  15. Удалите осадочную камеру.
  16. Окрасьте микропрепараты SurePath® и закройте их покровными стёклами.

Результаты и интерпретация

  • К препаратам на жидкой основе, приготовленным по методу компании TriPath Imaging®, Inc., можно применять все диагностические критерии, применяемые в настоящее время в цитологических лабораториях для традиционных мазков по Папаниколау.
  • Любые патологические или сомнительные явления, обнаруженные при скрининговом исследовании, должны быть направлены патологу для ознакомления и диагноза. Любые мофологические изменения клеток важны и должны быть отмечены.
Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицинский взгляд на еду
Adblock
detector