Цитологическая диагностика герпес вируса

Препараты для диагностики, специфической терапии и диагностики герпесвирусных инфекций

Препарат

Назначение

  1. Вакцина
    герпетическая культуральная живая
    сухая.

Препарат
применяется для лечения больных
герпетической инфекции. Курс лечения
состоит из 1-2 циклов с интервалом

7-10
дней. Цикл состоит из 5 инъекций с
интервалом 3-4 дня.

  1. Вакцина
    против ветряной оспы «Варилрикс»
    живая аттенуированная (Бельгия).

Применяется
для профилактики ветряной оспы детям
от 12 мес до 13 лет однократно, старше
13 лет двукратно с интервалом 6-10 недель.

  1. Вакцина
    для профилактики ветряной оспы
    «Окавакс»

Япония.

Для
создания иммунитета против ветряной
оспы однократно для всех лиц.

Препараты для диагностики, специфической терапии и диагностики герпесвирусных инфекций

Чтобы определить, есть ли герпесная инфекция в организме, используется несколько наиболее действенных способов:

  • культуральный;
  • ПЦР — полимеразная цепная реакция;
  • исследование методом ИФА.

Данные методы исследования являются наиболее точными, но из-за высокой стоимости их назначают нечасто. Метод серологического исследования считается самым распространенным, но он не определяет герпес 1 и 2 типа.

В результате диагностики указанным методом врач выявляет только сам факт наличия вируса. Иммуноточечный G-специфичный гликопротеин HSV-тест позволяет установить вирус и его тип с точностью до 98%.

Один из самых надежных методов исследования на герпес — культуральный. Однако он же является самым длительным и дорогостоящим. Диагностика герпеса в этом случае осуществляется путем заражения питательной среды биоматериалом с вирусом.

  • в желточный мешочек;
  • в аллантоисную полость;
  • на хорион-аллантоисную мембрану;
  • в амниотическую полость.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — метод, который позволяет выявить вирус герпеса в биологическом материале: крови, слюне, мокроте. Метод ПЦР хорош тем, что предоставляет возможность обнаружить вирус на этапе заражения, еще до начала клинических проявлений. Исследование выявляет всю сложность протекания процесса.

После заражения герпесвирусом в организме начинают вырабатываться антитела. Их наличие специалист может определить с помощью иммуноферментного анализа (ИФА).

Сначала появляются антитела IgM, потом IgG, устанавливается их норма. Полученные показатели помогают определить, на какой стадии находится заболевание.

Если уровень антител IgM и IgG низкий, то результат отрицателен. IgG — это положительные титры, lgM и IgA — отрицательные титры. Норма титров — это показатель 1:4 (IgG)и 1:5 (lgM). Если норма превышена, то обнаружен рецидив.

Обследование биологического материала проводится в лабораторных условиях. Сдается кровь на герпес только натощак. Перед сдачей биологического материала нельзя употреблять пищу в течение 8 часов, также нельзя есть жирное и жареное.

Анализ крови на герпес берут обычно до 10 часов утра. Моча не всегда берется на анализ и у ребенка, и у взрослого. Лаборатории могут использовать разные единицы измерения, реактивы и тесты для диагностики, поэтому и расшифровка может отличаться.

Герпес — заболевание с неприятными признаками. Его симптомом является появление язв и пузырьков на теле, чаще всего они образуются на губах. Это сигнализирует об ослаблении иммунной системы. Вспышки герпеса приходятся на зимний и осенний периоды.

Герпесвирус присутствует в человеческом организме постоянно, и полностью излечиться от него невозможно. Причинами клинических проявлений вируса являются:

  • ослабление иммунной системы;
  • наличие хронических заболеваний и их обострение;
  • частое употребление алкоголя и курение;
  • беременность.

Заражение герпесом может происходить несколькими способами:

  • через кровь;
  • воздушно-капельным путем;
  • половым путем;
  • внутриутробно (если носителем является кто-нибудь из родителей).

Герпес распространяется при контакте биологических выделений организма здорового человека и носителя. По данным научных исследований, носителями вируса признано около 90% людей на планете.

Излечение от герпеса невозможно, но существуют лекарственные препараты, способные полностью подавить проявления вируса. Главное — вовремя его диагностировать в организме и сразу приступить к лечению, в противном случае процесс может затянуться.

Чтобы обнаружить герпес, достаточно сдать мочу, кровь, содержимое пузырьков или соскоб со слизистых в специализированных лабораторных условиях. Подготовка биологического материала не требуется, достаточно воздержаться от еды за 8 часов до проведения обследования.

Занятие 24

Итоговое
занятие по медицинской вирусологии.

Цель:
Контроль знаний студентов, по разработанным
на кафедре тестовым заданиям 1,2 и 3
уровней.

Тестовые
задания, типовые и ситуационные задачи
к разделу приведены в приложении.

Приложение

ТЕМА:
МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ.

Цель:
изучить методы микробиологической
диагностики вирусных инфекций, методы
культивирования вирусов, индикации и
идентификации в курином эмбрионе и
культуре клеток.

Основоположником
вирусологии является русский ученый
Л.И.Ивановский, который в 1892 году открыл
вирус мозаичной болезни табака.

Для
вирусов характерны две формы существования:
внеклеточная и внутриклеточная.
Внеклеточный вирус имеет специфическую
корпускулярную форму и называется
вирион.

Рис.
№2. Схема строения вириона

Структура
вириона.
Вирионы состоят из нуклеиновой кислоты
(ДНК или РНК), окруженной белковой
оболочкой — капсидом. Простые вирионы
представляют собой нуклеокапсид, а по
химическому составу- нуклеопротеид.

Капсид вирионов состоит из определенного
числа белковых молекул — капсомеров. По
характеру расположения капсомеров
вирусы делят на три группы: с кубическим,
спиральным и смешанным типом симметрии.

Большинство патогенных для человека
вирусов имеет кубический тип симметрии.
Спиральный тип симметрии характерен
для орто — и парамиксовирусов и некоторых
арбовирусов.

Смешанный тип симметрии
отмечается у поксвирусов и бактериофагов.
Некоторые вирусы имеют дополнительную
внешнюю оболочку, которая называется
суперкапсидом.

Основные
особенности вирусов, отличающие их от
остальных

цитологическая диагностика герпес вируса

живых
организмов

  1. Вирионы
    содержат нуклеиновую кислоту только
    одного типа- ДНК или РНК. Все другие
    живые организмы содержат два типа
    нуклеиновых кислот (ДНК и РНК).

  2. У
    вирионов отсутствуют собственные
    белоксинтезирующие и энергообразующие
    системы. У них нет рибосом. Они используют
    рибосомы клеток хозяина.

  3. Абсолютный
    паразитизм.

  4. Вирионы
    не способны к росту и бинарному делению.
    Вирусы размножаются особым способом,
    который отличается от способов
    размножения всех других организмов.
    Их способ размножения называется
    дисъюнктивная (т.е. разобщения)
    репродукция.

Таким
образом, термин «вирус» означает
внеклеточную своеобразную форму жизни,
обладающую собственным геномом и
способную к воспроизведению лишь в
клетках более высокоорганизованных
существ.

ТЕМА:
МИКРОБИЛОГИЧЕСКАЯ
ДИАГНОСТИКА ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ.
МИКРОБИЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ВИЧ-
ИНФЕКЦИИ (ВИРУС ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА).

Цель:
иметь представление о биологических
особенностях возбудителей вирусных
гепатитов. Изучить методы микробиологической
диагностики вирусных гепатитов.

Иметь
представление о биологических особенностях
возбудителя вируса иммунодефицита
человека (ВИЧ). Изучить методы
микробиологической диагностики ВИЧ.

Возбудители
вирусных гепатитов.Вирусные
гепатиты являются важнейшей проблемой
инфекционной патологии. Это системные
инфекционные заболевания с преимущественным
поражением клеток печени.

В зависимости
от основных путей заражения вирусные
гепатиты делятся на энтеральные, к
которым относятся вирусы гепатитов А
и Е, и парентеральные, к которым относятся
вирусы гепатитов B,
C,
D,
G
и др.

Вирусный
гепатит А —
антропонозное острое инфекционное
заболевание, вызывается РНК содержащим
вирусом гепатита А и характеризуется
лихорадкой, поражением печени,
интоксикацией.

Вирус
гепатита А — обозначается HAV
(Hepatis
A
Virus)
и относится к семейству Picornaviridae,
к роду Enterovirus.
Открыт Фейнстоном в 1973 году в фекалиях
методом ИЭМ.

Вирион гепатита А представляет
однонитевую РНК, окруженную белковой
оболочкой. Как и другие представители
семейства пикорнавирусов, имеет мелкие
размеры 27 — 32 нм.

Капсид состоит из 60
капсомеров, суперкапсидной оболочки
не имеет. Вирус гепатита А не размножается
в куриных эмбрионах и организме
лабораторных животных.

В отличие от
других энтеровирусов плохо размножается
в культурах тканей. Вирус устойчив к
действию температуры (600
С в течение 12 часов), инактивируется при
1000
в
течение 5 минут. Быстро погибает при
действии дезинфицирующих веществ.

Источником
инфекции являются больные с явной
клинической картиной и со скрытой
инфекцией. Вирус выделяется с фекалиями
в течение последней недели инкубационного
периода и в поджелтушном периоде.

Хроническое носительство при гепатите
А не установлено. Механизм передачи
фекально — оральный. Пути передачи: через
воду, пищу, предметы обихода.

Нередко
отмечаются водные вспышки заболевания
в связи с фекальным загрязнением открытых
водоемов. Распространен повсеместно,
чаще в странах с дефицитом воды, с низкой
санитарной культурой населения.

Наиболее
восприимчивы дети от 4 до 15 лет (60%
заболевших — это дети до 14 лет). Исход
благоприятный 90% полного выздоровления,
после перенесенного заболевания
формируется стойкий иммунитет.

Вирусный
гепатит Е антропонозная
инфекция с фекально- оральным механизмом
передачи и преимущественным поражением
печени, вызывается вирусом гепатита E
(HEV).

HЕV
— РНК содержащий вирус, выделен в отдельный
род Hepevirus.
Вирион безоболочечный, сферический,
диаметром 27 — 34 нм. Геном – однонитевая
плюс — РНК.

Источник инфекции- больной
человек. Механизм передачи фекально-оральный.
Пути передачи — через пищу, воду.
Инкубационный период 2 — 6 недель.
Заболевание сопровождается умеренным
поражением печени, интоксикацией, реже
желтухой.

Прогноз благоприятный.
Заболевание тяжело протекает у беременных,
летальность у них достигает 20%. Иммунитет
после перенесенного заболевания стойкий.

Возбудители
парентеральных гепатитов.Гепатит
В -антропонозная
инфекция, вызываемая ДНК содержащимвирусом
с преимущественным парентеральным
механизмом заражения и поражением
печени в виде острого и хронического
гепатита с переходом в цирроз или
первичный рак печени.

Возбудитель
гепатита В (HВV)
относится к семейству Hepadnaviridae.
В 1970 году Дейн впервые обнаружил частицы
сферической формы в сыворотке крови
больных гепатитом методом электронной
микроскопии.

Возбудитель
гепатита В — ДНК- содержащий вирус,
имеющий суперкапсид сферической формы,
диаметром 42 нм. Сердцевина вируса Нвс,
окружена оболочкой, содержащей
поверхностный Нвs
аг (австралийский аг).

ПОДРОБНЕЕ:   Оборудование для гистологической лаборатории


Нвs
– аг (австралийский аг) представляет
собой гликопротеин с липидным компонентом,
который содержится во внешней оболочке
вируса.

Нвс
– является нуклеопротеином. Содержится
в сердцевине вирионов, находится в ядрах
гематоцитов, но не постоянно в крови.

Нве
– аг – отщепляетя от Нвс аг при прохождении
через мембрану гепацитов, вследствие
чего обнаруживается в крови.

Вирусы
чувствительны к эфиру, детергентам.
Необычным свойством вируса является
устойчивость к высокой температуре.
Они выдерживают нагревание до 100о
с 1 – 2 мин., устойчивость повышается при
нахождении в сыворотке крови.

Источником
инфекции являются больные с острой и
хронической формами гепатита, а также
вирусоносители. Основной путь заражения
— парентеральный. Механизм передачи —
при переливании крови, ее препаратов,
массовые прививки, хирургические
вмешательства, зубоврачебные манипуляции
и пр).

Заражение возможно при близком
бытовом контакте, половым путем. Возможна
передача вируса от матери плоду
трансплацентарно, а также после родов
через молоко, слюну и т.д. , т.е.

почти все
биологические жидкости больных гепатитом
В содержат вирус. Вирус проникает в
кровь парентерально, с кровью переносится
в печень и размножается в гепатоцитах.

Вирус
гепатита D.был
открыт в 1977 году Ризетто. Вирус гепатита
D
неклассифицирован.

Было
установлено, что ВГD
является сателлитом вируса гепатита
В, дефектным вирусом. Дефектом его
является отсутствие собственной
оболочки, поэтому для проявления
патогенного действия он должен
использовать оболочку вируса гепатита
В.

Резервуаром
вируса гепатита D
являются носители ВГВ. Передается
парентерально, также как и вирус В, но
распространен реже. Вирус гепатита D
может вызвать поражение печени лишь у
людей, уже инфицированных вирусом
гепатита В (супер-инфекция).

Инфицирование
вирусом гепатита больных с хроническим
гепатитом В вызывает тяжелые формы
заболевания с развитием печеночной
недостаточности и цирроза печени.

Диагностика
заключается в выявлении антител к ВГD
с помощью иммуноферментного метода.
Разработана также полимеразная цепная
реакция (ПЦР). Вакцина против гепатита
В защищает и от гепатита D.

Гепатит
С.(иначе
его называли гепатит ни А ни В). Вирус
гепатита С относится к семейству
Flaviviridae род Нерасivirus. Это РНКсодержащий
вирус диаметром — 55 — 60 нм.

вирион
сферической формы. Вирус имеет сложную
структуру. Имеет поверхностные
гликопротеидные антигены, сердцевинный
антиген (НСс-антиген). Источником инфекции
являются больные и носители гепатита
С.

Антитела
к вирусу гепатита С обнаружены у 0,5 — 1%
доноров. Заболевание протекает легче,
чем вызванное вирусом ГВ, лишь в четверти
случаев сопровождается желтухой.

Гепатит
G.Вирус
гепатита G
предположительно относится к семейству
к Feaviviridae
к роду Hepacivirus.
известно 5 генотипов вируса – GB-A,
GB-B,
GB-C
и др.

Микробиологическая
диагностика вирусных гепатитов.

Гепатит
АДля
лабораторной диагностики гепатита А
применяются методы: ИЭМ (иммунной
электронной микроскопии). Принцип метода
ИЭМ основан на формировании комплексов
антиген- антитело (при смешивании
исследуемого антигена и заведомо
известный специфической антисыворотки
или заведомо известного антигена и
исследуемой сыворотки).

Микроскопические и быстрые способы диагностики

Методы микроскопического исследования:

  • диагностика цитологическая;
  • микроскопия электронная.

Цитологическая диагностика позволяет исследовать особенности развития болезни и определить ее стадию. Особенно эффективен такой метод при исследовании соскоба у пациентов с герпетическим стоматитом. Стадии развития данной болезни бывают следующими:

  • типичные поражения клеток или дегенерация;
  • неспецифическое воспаление и дегенерация;
  • регенерация;
  • эпителизация.

Цитологический метод можно смело отнести к экспресс-диагностическому, так как результаты определяются через 2-3 часа.

К способам экспресс-диагностики относятся:

  1. Электронная микроскопия — в исследуемом образце выявляются вирусные клетки. Такой анализ на герпес у ребенка или взрослого применим в основном в научных исследованиях, а не в лабораториях. Объясняется это дороговизной исследования.
  2. Гибридизация ДНК — метод, который позволяет выявить геном вируса после его гибридизации.

Иногда анализы могут давать ложноотрицательные результаты. Это случается, если не соблюдаются технологии исследования или используются некачественные реактивы.

Герпес – вирус, который при действии неблагоприятных факторов вызывает серьезные проблемы со здоровьем. Он может спровоцировать появление тяжелых болезней, вплоть до онкологии.

Из множества существующих разновидностей этого вируса опасность для людей представляют только восемь видов:

  • Герпес на губах1 тип (простой вид герпеса) – характерной является сыпь на губах. Простой герпес представляет собой группу пузырьков, имеющих прозрачное содержимое. Поверхность, на которой расположены пузырьки, имеет воспаленный характер;
  • 2 тип (простой вид герпеса) – вызывает поражение гениталий;
  • 3 тип – причина заболевания ветряной оспой и опоясывающим лишаем. Если в детстве была перенесена ветряная оспа, то при этой ситуации герпес 3 типа не исчезает и при снижении у человека иммунитета начинает активизироваться;
  • 4 тип (вирус Эпштейна-Барр) – следствием является появление мононуклеоза. Заболевание характеризуется лихорадкой, развитием тонзиллита, фарингита;
  • 5 тип (цитомегаловирус) – является причиной возникновения болезни цитомегалии. Симптомы сходны с простудными проявлениями;
  • 6, 7 и 8 типы – еще не изучены окончательно, могут являться причиной внезапного возникновения сыпи, имеющей вид пузырьков.

Диагностика герпеса начинается с внешнего осмотра специалистом, который может с высокой вероятностью определить это заболевание. Высыпания имеют специфический вид: язвочки, эрозии, корочки.

Опросив пациента, можно выяснить, имел ли он контакт с носителем вируса, и когда это было. Также существует ряд анализов, позволяющих с высокой точностью поставить диагноз:

  1. Серологическое исследованиеСамым распространенным методом для выявления вируса является серологическое исследование. Недостатком является то, что оно не выявляет тип герпеса. При постановке диагноза этим методом может быть выявлен только тот факт, что вирус присутствует.
  2. Культуральный анализ. Является надежным, но недостаток – в длительности его проведения и высокой стоимости. Он состоит в том, что осуществляется посев материала в питательную среду. Впоследствии происходит исследование с помощью микроскопа. Условием проведения исследования этим методом является то, что развитие вирусов происходит в живых клетках. Лучшая среда для культивирования – куриные эмбрионы.
  3. Полимеразная цепная реакция ПЦР. Метод, позволяющий найти вирус в крови, мокроте, моче, слюне. Преимуществом этого метода является то, что при его использовании имеется возможность обнаружения вируса еще в начале заражения, до того, как начнутся основные проявления. Заключается он в увеличении концентрации вируса в биологической пробе.
  4. Иногда применяют цитологический метод. Заключается в том, что соскоб окрашивается по Романовскому-Гимзе и изучается с помощью световой микроскопии.
  5. ИФА. После того как произошло заражение герпесом, у человека начинается выработка антител. Наличие их можно обнаружить методом ИФА – иммуноферментным анализом. Способ обладает высокой точностью.

I. Тестовые задания и ситуационные задачи по разделу «Микробиологическая диагностика кишечных инфекций».

1.
В клинику поступил грудной ребенок с
явлениями диспепсии. Предполагаемый
диагноз – колиэнтерит. Какой материал
надо взять для исследования и как
провести микробиологическую диагностику?

2.
При посеве испражнений ребенка на среду
Эндо получены красные колонии с
металлическим блеском. С 10 колониями
поставили ориентировочную реакцию
агглютинации с поливалентной О-сывороткой.

3.
При изучении биохимических свойств
культуры, выделенной из испражнений
ребенка, получен следующий результат:
глюкоза, лактоза, мальтоза и маннит
ферментированы до кислоты и газа,
сахароза не ферментирована.


4.
В клинику поступил больной с высокой
температурой. Реакция Видаля положительна
в титре 1:100. Ваше заключение.

  1. У
    больного, поступившего в инфекционную
    клинику с подозрением на брюшной тиф,
    реакция Видаля положительна в разведении
    сыворотки 1:800 с О-диагностикумом и 1:400
    с Н-диагностикумом. Подтверждают ли
    результаты реакции предполагаемый
    диагноз?

  2. В
    клинику поступил больной с пищевым
    отравлением. Как выделить возбудителя?
    Что служит материалом для исследования?
    На какие питательные среды надо посеять
    материал?

  3. Из
    рвотных масс больного выделены
    сальмонеллы. Как Вы будете их
    идентифицировать? Какие сальмонеллы
    чаще всего вызывают отравление?

  4. При
    посеве пищевого продукта (соскоба из
    поверхности и кусочка из глубины массы)
    на косой мясо-пептонный агар в
    конденсационную воду получен ползучий
    рост по поверхности агара в виде голубого
    нежного налета. При микроскопии
    обнаружены подвижные грамотрицательные
    палочки. Дайте предварительное заключение
    – какой микроб присутствует в пищевом
    продукте, вызвавшем отравление.

  5. У
    больного пищевое отравление.
    Бактериологически диагноз сальмонеллеза
    не подтвердился. Есть ли возможность
    ретроспективно подтвердить диагноз
    сальмонеллеза?

  6. В
    клинику поступил ребенок с подозрением
    на бактериальную дизентерию. Необходимо
    выделить возбудителя. Как следует взять
    материал для исследования, учитывая
    неустойчивость дизентерийных бактерий
    во внешней среде.

  7. При
    посеве испражнений на среде Плоскирева
    выросли единичные красные и бесцветные
    S-формы
    колонии в значительном количестве.
    Какие бактерии дали красные колонии?
    Какие из этих колоний характерны для
    шигелл? Как дальше проводится
    бактериологическое исследование
    выросшей культуры?

  8. Поставили
    реакцию агглютинации выделенной
    культуры шигелл со специфическими
    агглютинирующими сыворотками групп
    А, В, С, D.
    Положительная реакция агглютинации
    получена с сывороткой группы D.
    Дайте заключение.

13.
а) В инфекционную клинику г. Махачкалы
доставлен больной, у которого отмечаются
сильная рвота, понос в виде «рисового
отвара», понижение температуры тела.

б)
В мазках из исследуемого материала
отмечаются грамотрицательные вибрионы,
расположенные в виде «стаек рыб».
Соответствует ли результат микроскопии
Вашему предварительному диагнозу?

в)
Каким образом следует продолжить
лабораторные исследования для
окончательного диагноза?

  1. При
    посеве исследуемого материала на
    щелочной МПА выросли прозрачные S-
    формы колонии с голубоватым оттенком
    выпуклые дисковидные с розовыми краями,
    а на щелочном бульоне 1% щелочной
    пептонной воде- нежная поверхностная
    пленка с голубоватым оттенком. Для
    какого микроба характерны эти
    культуральные свойства?

  2. Из
    исследуемого материала выделена
    культура, подозрительная на холерный
    вибрион. По каким признакам проводится
    дифференциация холерного и холероподобного
    вибрионов?

  3. Выделен
    холерный вибрион. По каким свойствам
    можно отличить классический холерный
    вибрион от вибриона Эль- Тор?

ПОДРОБНЕЕ:   Цитологический тест проводят для определения сахарного диабета

1.
ДЛЯ
ДИАГНОСТИКИ БРЮШНОГО ТИФА СТАВЯТ
СЕРОЛОГИЧЕСКУЮ РЕАКЦИЮ

1)
Видаля


2)
Вассермана

3)
Борде — Жангу

4)
Асколи

5)
Райта

  1. БАКТЕРИАЛЬНАЯ
    ДИЗЕНТЕРИЯ – ЭТО

1)
шигеллез


2)
сальмонеллез

3)
эшерихиоз

4)
трепонематоз

5)
микобактериоз

  1. ДЛЯ
    ВЫДЕЛЕНИЯ ГЕМОКУЛЬТУР ПРИ ДИАГНОСТИКЕ
    БРЮШНОГО ТИФА И ПАРАТИФОВ КРОВЬ ЗАСЕВАЮТ
    НА СРЕДУ

1)
Раппопорта

2)
Эндо

3)
Желточно — солевую среду

4)
МПА


5)
Левенштейна – Йенсена

  1. ДИАГНОСТИКА
    БРЮШНОГО ТИФА НА ПЕРВОЙ НЕДЕЛЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ
    ПРОВОДИТСЯ ПУТЕМ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО
    ИССЛЕДОВАНИЯ

1)
желчи

2)
крови

https://www.youtube.com/watch?v=phw_JTxsXGY

3)
испражнений

4)
гноя

5)
мочи

  1. ПРИ
    БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКЕ
    ДИЗЕНТЕРИИ ИСПРАЖНЕНИЯ ЗАСЕВАЮТ

1)
на МПА

2)
на среду Плоскирева

3)
на сахарный МПБ


4)
на среду Китта – Тароцци

5)
на среду Леффлера

  1. ДЛЯ
    БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
    КОЛИЭНТЕРИТОВ ИСПРАЖНЕНИЯ БОЛЬНОГО
    ЗАСЕВАЮТ НА

1)
МПА

2)
среду Леффлера

3)
среду Эндо

4)
желчный бульон

5)
среду Вильсон – Блера

  1. ДЛЯ
    МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
    ДИЗЕНТЕРИИ ПРИМЕНЯЮТ

1)
бактериологическое исследование
испражнений


2)
кожно-аллергическую пробу Манту

3)
реакцию флокуляции

4)
микроскопию мазка

5)
феномен Исаева – Пфейффера

  1. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ
    ПРОФИЛАКТИКА ХОЛЕРЫ ПРОВОДИТСЯ ПУТЕМ
    ПРИМЕНЕНИЯ

1)
антитоксической сыворотки

2)
живой вакцины


3)
анатоксина — холерогена

4)
аутовакцины

5)
вакцины АКДС

  1. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ
    ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ ПРОВОДИТСЯ ПУТЕМ

1)
посева исследуемого материала на
щелочную пептонную воду

2)
микроскопии мазков крови

3)
исследования испражнений в реакции
преципитации

4)
заражения белых мышей

5)
постановки кожно-аллергической пробы

  1. РОСТ
    ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА НА ПИТАТЕЛЬНОЙ
    СРЕДЕ ОТМЕЧАЕТСЯ


1)
через 24-48 ч

2)
через 6-8 ч

3)
через 1-2 недели

4)
в анаэробных условиях

5)
при повышенной концентрации СО2

  1. ДЛЯ
    МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
    ДИЗЕНТЕРИИ ВЕДУЩИМ ЯВЛЯЕТСЯ МЕТОД

1)
микроскопический

2)
бактериоскопический


3)
бактериологический

4)
биологический

5)
аллергический

  1. КОПРОКУЛЬТУРА
    – ЭТО КУЛЬТУРА, ВЫДЕЛЕННАЯ ИЗ

1)
крови

2)
мочи

3)
испражнений

4)
гноя


5)
ликвора

  1. ИДЕНТИФИКАЦИЯ
    САЛЬМОНЕЛЛ ПРОВОДИТСЯ НА ОСНОВАНИИ
    ПРИЗНАКОВ

1)
морфологических

2)
тинкториальных

3)
антигенных

4)
фаголизабельных

5)
антибиотико – чувствительности

  1. БИЛИКУЛЬТУРА
    – КУЛЬТУРА, ВЫДЕЛЕННАЯ ИЗ

https://www.youtube.com/watch?v=zQNs9l4A31A

1)
крови


2)
гноя

3)
желчи

4)
испражнений

5)
мочи

  1. ЭНТЕРОТОКСИГЕННЫЕ
    КИШЕЧНЫЕ ПАЛОЧКИ ВЫЗЫВАЮТ У ЧЕЛОВЕКА

1)
дизентерие подобное заболевание


2)
холероподобную коли инфекцию

3)
колиэнтериты

4)
брюшной тиф

5)
паратифы

  1. ДИФФЕРНЦИАЦИЯ
    СВОЙСТВ БАКТЕРИЙ НА СРЕДЕ ЭНДО ОСНОВАНА
    НА

1)
расщеплении глюкозы

2)
расщеплении лактозы

3)
разложении пептона

4)
грампозитивной и грамнегативной окраске

5)
выявлении гемолитической активности

  1. КОЛИЭНТЕРИТЫ
    У ДЕТЕЙ ВЫЗЫВАЮТ КИШЕЧНЫЕ ПАЛОЧКИ


1)
энтеропатогенные

2)
энтеротоксигенные

3)
энтероинвазивные

4)
энтероадгезивные

5)
энтерогеморрагические

  1. РЕАКЦИЯ
    ВИДАЛЯ В РАЗГАР ЗАБОЛЕВАНИЯ ХАРАКТЕРИЗУЕТСЯ

1)
наличием О и Н агглютининов в диагностическои
титре


2)
наличием только Н-антител

3)
наличием К-антител

4)
снижением титра-антител

5)
верно все перечисленное

  1. ПРИ
    «ПРИВИВОЧНОМ» ВИДАЛЕ НАБЛЮДАЕТСЯ

1)
нарастание титра специфических антител

2)
присутствие специфических Н-антител

3)
наличие О — антител в высоком титре

4)
отсутствие антител


5)
наличие антител к дизентерийным бактериям

  1. ИСТОЧНИК
    ИНФЕКЦИИ ПРИ БРЮШНОМ ТИФЕ

1)
больной человек

2)
крупный рогатый скот

3)
мелкий рогатый скот

4)
грызуны

5)
свиньи

  1. ПИЩЕВЫЕ
    ТОКСИКОИНФЕКЦИИ ХАРАКТЕРИЗУЮТСЯ

1)
коротким инкубационным периодом

3)
стойким иммунитетом после перенесенного
заболевания

3)
хроническим течением


4)
длительным инкубационным периодом

5)
трансмиссивным путем заражения

  1. МАТЕРИАЛОМ
    ДЛЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
    ПРИ САЛЬМОНЕЛЛЕЗАХ СЛУЖАТ

1)
спинномозговая жидкость

2)
мокрота

3)
испражнения

4)
мазок из зева


5)
мазок из влагалища

  1. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ
    ДИАГНОСТИКА ПРИ САЛЬМОНЕЛЛЕЗАХ ВКЛЮЧАЕТ

1)
микроскопию испражнений

2)
аллергическую пробу

3)
постановку реакции Асколи

4)
идентификацию возбудителя с помощью
адсорбированных

монорецепторных
сывороток

5)
постановку реакции Райта

  1. ДИЗЕНТЕРИЯ
    В НАСТОЯЩЕЕ ВРЕМЯ НАИБОЛЕЕ ЧАСТО
    ВЫЗЫВАЕТСЯ ШИГЕЛЛАМИ


1)
Флекснера

2)
Зонне

3)
Григорьева-Шига

4)
Бойда

5)
Видаля

  1. ИССЛЕДУЕМЫЙ
    МАТЕРИАЛ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ КОЛИЭНТЕРИТОВ
    У ДЕТЕЙ

1)
испражнения

2)
моча


3)
материнское молоко

4)
спинномозговая жидкость

5)
гнойное отделяемое из раны

  1. КИШЕЧНАЯ
    ПАЛОЧКА ФЕРМЕНТИРУЕТ

1)
лактозу до кислоты и газа

2)
глюкозу с образованием кислоты без газа

3)
мальтозу с образованием сероводорода


4)
глюкозу с образованием ацетона

5)
сахарозу до кислоты и газа

  1. БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ
    ДИАГНОСТИКА ПРИ ЭШЕРИХИОЗАХ ВКЛЮЧАЕТ

1)
идентификацию патогенных сероваров с
помощью диагностических сывороток

2)
микроскопию испражнений

3)
посев на среду Бучина

4)
биологическую пробу на белых мышах

5)
определение уреазной и цистиназной
активности

  1. РЕЗИСТЕНТНОСТЬ
    ВОЗБУДИТЕЛЯ ХОЛЕРЫ

1)
быстро погибает при низкой температуре


2)
чувствителен к кислой среде желудочного
сока

3)
сохраняется при кипячении

4)
устойчив к действию дезинфицирующих
веществ

5)
в испражнениях больного мало устойчив

  1. САЛЬМОНЕЛЛЫ
    — ВОЗБУДИТЕЛИ ПИЩЕВЫХ ТОКСИКОИНФЕКЦИЙ

1)
S.typhi


2)
S.paratyphi A

3)
S.paratyphi B

4)
S.typhimurium

5)
S.
Enteritidis

  1. ХОЛЕРОГЕН,
    СИНТЕЗИРУЕМЫЙ ХОЛЕРНЫМ ВИБРИОНОМ
    ОТНОСИТСЯ К

1)
экзотоксинам

2)
эндотоксинам

3)
анатоксинам

4)
бактериоцинам


5)
бактериофагам

  1. ДЛЯ
    ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ ПО
    СПОСОБНОСТИ ФЕРМЕНТИРОВАТЬ ЛАКТОЗУ,
    ИСПОЛЬЗУЮТ СРЕДЫ

1)
Левина

2)
МПБ

3)
Плоскирева

4)
Эндо

5)
МПА

  1. ИСТОЧНИКОМ
    ИНФЕКЦИИ ПРИ ХОЛЕРЕ ЯВЛЯЕТСЯ

1)
больной человек или бактерионоситель


2)
насекомые — переносчики

3)
крупный рогатый скот

4)
мелкий рогатый скот

Алгоритм обследования

Беременные относятся к группе риска, поэтому обследование на герпес они должны проходить каждый триместр. Обязательно нужно сдавать кровь на герпес перед тем, как планировать беременность. Вирус герпеса может отрицательно отразиться на развитии плода.

Если вирус выявлен в организме и его уровень значительно повышен, то необходимо провести лечение еще перед планированием беременности. Опаснее всего заражение герпесом в первый триместр беременности, когда происходит формирование плода.

Такой вирус негативно влияет на процесс внутриутробного развития ребенка. Если подозревается заражение вирусом, необходимо провести исследование методом ИФА.

Обострение симптомов часто возникает за несколько дней до менструального кровотечения. Это случается из-за усиленной выработки гормона прогестерона. Данный факт обязательно должен учитываться врачом при расшифровке результатов сданного анализа.

Золотой стандарт вирусологической диагностики герпеса – это так называемый вирусологический метод обследования. Он заключается в выделении вируса и определении его типа.

Степень чувствительности этого биологического метода составляет 70-80 %. Она зависит от той стадии заболевания, когда был получен материал для исследования.

Наиболее высокая чувствительность данного метода – на первой стадии во время острого процесса. По мере образования язв и корочек она начинает снижаться.

Метод, в отличие от серологического исследования, позволяет обнаружить и дифференцировать герпес 1 и 2 типов. При сдаче анализов следует выполнять определенные правила.

Вопросы для самоконтроля.

  1. Общая
    характеристика риккетсии. Их
    таксономическое положение в систематике
    микроорганизмов. Что общего у риккетсии
    с бактериями, и какие свойства их
    сближают с вирусами?

  2. Назовите
    методы культивирования риккетсий.

  3. Каков
    механизм заражения эпидемическим
    сыпным тифом?

  4. Какие
    микробиологические методы применяются
    для диагностики сыпного тифа
    (эпидемического и эндемического)?

  5. Как
    отличить болезнь Брилля — Цинссера от
    сыпного тифа?

  6. Перечислите
    методы диагностики Ку — лихорадки.

  7. Таксономическое
    положение хламидий. Их роль в патологии
    человека.

  8. Методы
    лабораторной диагностики хламидиозов.

  1. Какие
    вирусы относятся к энтеровирусам? Дайте
    общую характеристику рода энтеровирусов?

  2. Принципы
    антигенной классификации энтеровирусов.

  3. Дайте
    характеристику вируса полиомиелита.
    Сколько существует серотипов полиовируса?

  4. Какие
    вирусологические методы применяют для
    диагностики полиомиелита и других
    энтеровирусных заболеваний?

  5. Какие
    серологические методы диагностики
    могут быть использованы при заболевании
    полиомиелитом?

  6. Можно
    ли провести серодиагностику полиомиелита,
    располагая лишь одной сывороткой,
    полученной от больного в остром периоде
    заболевания?

  7. Укажите
    препараты, применяемые для специфической
    профилактики полиомиелита.

  8. Какие
    вирусы относятся к пикорновирусам?

  9. Перечислите
    заболевания, вызаемые вирусами Коксаки
    и ECHO.

  10. Методы
    диагностики вирусной инфекции Коксаки
    и ECHO.

  1. Дайте
    характеристику вируса гепатита A.

  2. Методы
    микробилогической диагностики вирусных
    гепатитов A
    и E.

  3. Дайте
    характеристику вирусов гепатита B,C
    и D.

  4. Методы
    микробилогической диагностики вирусных
    гепатитов B
    и C.

  5. К
    какому семейству и подсемейству
    относится ВИЧ?

  6. Какие
    клетки организма являются «мишенью»
    для ВИЧ?

  7. Что
    такое иммунорегуляторный индекс (ИРИ)
    и чему он равняется у больных ВИЧ-инфекцией?

  8. Механизм
    действия фермента обратной траскриптазы
    или ревертазы.

  9. В
    каких случаях употребляют термины ВИЧ,
    СПИД?

  10. Основные
    пути передачи ВИЧ.

  11. Контингенты
    риска при ВИЧ — инфекции.

  12. Перечислить
    первичный комплекс симптомов, позволяющих
    заподозрить заболевание.

  13. Почему
    до сих пор не решен вопрос изготовления
    вакцины при ВИЧ-инфекции?

  14. Разработана
    ли специфическая прфилактика ВИЧ-
    инфекции?

I. Тестовые задания и ситуационные задачи по разделу «Микробиологическая диагностика кишечных инфекций».

1)
Видаля

2)
Вассермана

3)
Борде — Жангу

4)
Асколи

5)
Райта

1)
шигеллез


2)
сальмонеллез

3)
эшерихиоз

4)
трепонематоз

5)
микобактериоз

1)
Раппопорта

2)
Эндо


4)
МПА

1)
желчи

2)
крови

3)
испражнений

4)
гноя

5)
мочи

1)
на МПА

1)
МПА


2)
среду Леффлера

3)
среду Эндо

4)
желчный бульон

2)
живой вакцины

4)
аутовакцины

5)
вакцины АКДС

1)
через 24-48 ч

2)
через 6-8 ч

4)
биологический


5)
аллергический

1)
крови

2)
мочи

3)
испражнений

4)
гноя

5)
ликвора

2)
тинкториальных

3)
антигенных


1)
крови

ПОДРОБНЕЕ:   Заключение nilm цитологический диагноз

2)
гноя

3)
желчи

4)
испражнений

5)
мочи

3)
колиэнтериты

4)
брюшной тиф

5)
паратифы


4)
грызуны

5)
свиньи

2)
мокрота

3)
испражнения

4)
мазок из зева

1)
Флекснера


2)
Зонне

4)
Бойда

5)
Видаля

1)
испражнения

2)
моча


1)
S.typhi

2)
S.paratyphi A

3)
S.paratyphi B

4)
S.typhimurium

1)
экзотоксинам


2)
эндотоксинам

3)
анатоксинам

4)
бактериоцинам

5)
бактериофагам

1)
Левина

2)
МПБ

3)
Плоскирева


4)
Эндо

5)
МПА

5)
мыши

  1. ПРИЗНАКИ,
    ХАРАКТЕРНЫЕ ДЛЯ ВСЕХ ПАТОГЕННЫХ
    ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ

1)
ферментация лактозы

2)
наличие О — антигена

3)
наличие ЛПС

4)
образование экзотоксина


5)
отсутствие жгутиков

  1. ВОЗБУДИТЕЛЬ
    ХОЛЕРЫ АГГЛЮТИНИРУЕТСЯ

1)
01 — сывороткой

2)
02 — сывороткой

3)
03 — сывороткой

4)
04 — сывороткой


5)
не агглютинируется сывороткой

  1. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
    ОСОБЕННОСТИ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА

1)
прихотлив к питательным средам

2)
растет в анаэробных условиях

3)
способен расти на холоде

4)не
требователен к условиям культивирования,
способен к быстрому росту

5)
нуждается в длительном культивировании

  1. ОСНОВНЫЕ
    КРИТЕРИИ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ
    ВОЗБУДИТЕЛЕЙ азиатской
    холеры и холеры Эль — Тор

1)
гемолиз эритроцитов барана


2)
чувствительность к пенициллину

3)
чувствительность к бактериофагам

4)
агглютинация куриных эритроцитов

5)
отсутствие подвижности

  1. ФАКТОРЫ
    ПАТОГЕННОСТИ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА

1)
арабиноза

2)
экзотоксин


3)
эндотоксин

4)
наличие капсулы

5)
нейраминидаза

  1. ОСНОВНЫЕ
    СВОЙСТВА О — АНТИГЕНА ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ

1)
представлен ЛПС

2)
термостабилен

3)
белковой природы

4)чувствителен
к действию формалина и спирта

5)
термолабилен

  1. ДИАГНОСТИКА
    БРЮШНОГО ТИФА В СТАДИИ РЕКОНВАЛЕСЦЕНЦИИ
    ПРОВОДИТСЯ ПУТЕМ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО
    ИССЛЕДОВАНИЯ


1)
крови

2)
гноя

3)
испражнений

4)
мазка из зева

5)
желудочного сока

  1. ИНГРЕДИЕНТЫ
    НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ
    ВИДАЛЯ

1)
брюшнотифозный О — диагностикум

2)
брюшнотифозный Н — диагностикум

3)
эритроцитарный Vi-диагностикум

4)
комплемент


5)
гемолитическая сыворотка

41.
ДЛЯ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ БРЮШНОГО
ТИФА В КАЧЕСТВЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
ИСПОЛЬЗУЮТ

1)
кровь

2)
желчь

3)
ликвор


4)
слизь из носоглотки

5)
испражнения

42.
ДЛЯ
ДИАГНОСТИКИ БРЮШНОГО ТИФА НА 3-4 НЕДЕЛЕ
ИСПОЛЬЗУЮТ

1)
бактериологическое исследование крови

2)
серологическую диагностику

3)
выделение копрокультуры

4)
бактериологическое исследование ликвора


5)
бактериологическое исследование мокроты

43.
ДЛЯ
УСКОРЕННОГО ОБНАРУЖЕНИЯ ХОЛЕРНОГО
ВИБРИОНА ИСПОЛЬЗУЮТ

1)
иммунофлюоресцентный метод

2)
выделение биликультуры

3)
серологический метод


4)
аллергический метод

5)
полимеразно-цепную реакцию

43.
СЕРОВАРЫ
ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА

1)
Огава

2)
Инаба

3)
Гикошима

4)
Эль-Тор


5)
Бюрне

44.
ВОЗБУДИТЕЛЯМИ
ПИЩЕВЫХ ТОКСИКОИНФЕКЦИЙ ЯВЛЯЮТСЯ

1)
кишечная палочка

2)
ВИЧ

3)
сальмонеллы


4)
дифтерийная палочка

5)
протей

45.
МАТЕРИАЛЫ,
ИССЛЕДУЕМЫЕ ПРИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОМ
ДИАГНОСТИКЕ БОТУЛИЗМА

1)
ликвор

2)
рвотные массы

3)
трупный материал

5)
пищевые продукты

46.ПУТИ
ПЕРЕДАЧИ ХОЛЕРЫ

1)
водный


2)
контактный

3)
алиментарный

4)
воздушно-капельный

5)
воздушно-пылевой

47.
ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ
СРЕДОЙ ДЛЯ ШИГЕЛЛ ЯВЛЯЕТСЯ

1)
среда Плоскирева

2)
МПА

3)
Кровяной агар


4)
среда Китта-Тароцци

5)
среда Раппопорта

48.
ПОДВИЖНОСТЬ
Е.COLI
ОПРЕДЕЛЯЮТ

1)
по Граму

2)
по Нейссеру


3)
методом «висячей капли»

4)
по Цилю-Нильсену

5)
реакцией агглютинации

49.
АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ
ВЫДЕЛЕННОЙ КУЛЬТУРЫ ШИГЕЛЛ ОПРЕДЕЛЯЮТ

1)
методом мембранных фильтров

2)
фаготипированием


3)
методом бумажных дисков

4)
РИФ

5)
ПЦР (полимеразно-цепная реакция)

50.
ДЛЯ
СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ДИЗЕНТЕРИИ
ПРИМЕНЯЕТСЯ РЕАКЦИЯ

1)
Райта


2)
Асколи

3)
РПГА

4)
Манту

5)
Оухтерлони

51.
ОСНОВНОЙ
МЕХАНИЗМ ПЕРЕДАЧИ ХОЛЕРЫ

1)
аэрогенный

2)
кровяной


3)
вертикальный

4)
фекально-оральный

5)
контактно-половой

52.
ФАКТОР,
ОБУСЛОВЛИВАЮЩИЙ РАЗВИТИЕ ДИАРЕИ ПРИ
ХОЛЕРЕ

1)
инвазия эпителия кишечника


2)
циркуляция возбудителя в кровотоке

3)
образование дефектов кишечной стенки

4)
действие экзотоксина

5)
действие эндотоксина

53.
ИСТОЧНИКИ
ИНФЕКЦИИ ПРИ ХОЛЕРЕ

1)
больные и бактерионосители

2)
насекомые-переносчики

3)
грызуны

4)
гидробионты


5)
крупный рогатый скот

54.
НА
СРЕДЕ ЭНДО КИШЕЧНАЯ ПАЛОЧКА ОБРАЗУЕТ

1)
бесцветные колонии с голубоватым
оттенком

2)
колонии желтого цвета

3)
колонии с зоной гемолиза вокруг колоний


4)
красные колонии с металлическим блеском

5)
синие колонии

55.
ДИЗЕНТЕРИЕПОДОБНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ ВЫЗЫВАЮТ
ЭШЕРИХИИ

2)
энтероинвазивные

3)
энтеротоксигенные

4)
энтерогеморрагические

5)
парентеральные


56.
МАТЕРИАЛОМ
ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ ПИЩЕВЫХ
ТОКСИКОИНФЕКЦИЯХ ЯВЛЯЮТСЯ

1)
рвотные массы

2)
остатки продуктов

3)
промывные воды желудка

5)
моча

57.
ДЛЯ
ВЫДЕЛЕНИЯ PROTEUS
VULGARIS,
КАК ВОЗБУДИТЕЛЯ ПИЩЕВЫХ ТОКСИКОИНФЕКЦИЙ
используют
питательную среду

1)
Клауберга

2)
Эндо

3)
скошенный агар по Шукевичу


4)
Раппопорта

5)
Ресселя

  1. Микроскопический
    метод. а) обнаружение в исследуемом
    материале с помощью специальных методов
    окраски внутриклеточных телец —
    включений. Например, при бешенстве
    (тельца Бабеша — Негри), герпетической
    инфекции, при ветряной оспе др., б)
    обнаружение возбудителя в пораженной
    ткани с помощью флюоресцирующих антител
    (РИФ), в) обнаружение возбудителя с
    помощью электронной микроскопии. Этот
    метод требует достаточно высокой
    концентрации возбудителя в пораженной
    ткани. Поэтому отрицательные результаты
    не являются диагностически значимыми.

  2. Вирусологический
    метод. Для выделения чистой культуры
    вируса используют следующие методы:
    а) заражение куриных эмбрионов, б)
    заражение культур клеток

  3. Биологический
    метод.

Заражение
чувствительных к данному вирусу
лабораторных животных исследуемым
материалом с целью воспроизведения
заболевания или последующего выделения
вируса.

  1. Серологический
    метод.

Обнаружение
противовирусных антител в сыворотке
больного или реконволесцента. При
серологической диагностике вирусных
инфекций широко используют следующие
реакции: РСК- реакция связывания
комплемента, РТГА- реакция торможения
гемагглютинации, РИФ- реакция
иммунофлюоресценции, РБН- реакция
биологической нейтрализации вируса,
РИА- радиоиммунный анализ, ИФА-
иммуноферментный анализ.

РИА и ИФА
отличаются наибольшей чувствительностью
по сравнению с другими серологическими
реакциями. Серологические методы просты
и позволяют исследовать большое
количество проб за короткий промежуток
времени.

Этими методами выявляют
нарастание антител в парных сыворотках
переболевших с помощью набора вирусных
диагностикумов (антгенов). У больного
сыворотку берут в начале заболевания
и затем через 2-4 недели.

Поэтому называются
эти сыворотки парные, т.е. две (пара)
сыворотки. Парные сыворотки исследуют
совместно, начиная с разведений 1:10.
Показателем свежеперенесенной инфекции
является не менее чем четырехератное
нарастание титра антител во второй
сыворотке. Молекулярно- генетический.

а)
ДНК- зонд диагностика, б) ПЦР — диагностика.

2.
Обнаружение вируса в культуре ткани
методом «цветной пробы». В
основу «цветной реакции» положено, то
обстоятельство, что в процессе размножения
и роста клеток в питательной среде
накапливаются кислые продукты обмена
веществ, сдвигающие рН среды, в кислую
сторону.

В ткани, зараженной вирусом,
наступает дегенерация клеток, метаболизм
их подавляется и не происходит изменения
рН среды. Для выявления этих изменений
в питательную среду добавляют индикатор
феноловый.

При рН выше 7 цвет индикатора
красный, при рН 7- оранжевый, рН ниже 7-
желтый. Если клетки не заражены вирусом
(или он нейтрализован специфической
сывороткой), то рН питательной среды
сдвигается в кислую сторону, и она
становится желтой.

Таблица
№33

Ингредиент

Разведение
сыворотки

Контроль

1:4

1:8

1:16

1:32

1:64

Токсичности
сыворотки

Роста
клеток

Роста
вируса

Сыворотка,
мл

Вирус,
мл

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

40
минут при комнатной температуре для
нейтрализации вируса

Клеточная

суспензия,
мл

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

Вазелиновое
масло, мл

По
0,4 во все пробирки

Термостат
37
3-7 дней

Результат:
Пожелтение цвета среды свидетельствует
о нейтрализации вируса

антителами
сыворотки

4.
Обнаружение противовирусных антигенов
с помощью реакции преципитации. Реакция
преципитации в агаре широко используется
для диагностики вирусных заболеваний
(полиомиелита, Коксаки и др.

Постановка
реакций преципитации на предметных
стеклах для выявления антигена вируса
полиомиелита.

На
обычные предметные стекла наносят 2 мл
расплавленного и охлажденного до 60º
агара
(I
% — ый агар
на физиологическом растворе с 1:20000
мертиолята).

Толщина слоя агара на стекле
составляет около I мм. После застывания
агара в нем вырезают лунки диаметром
3-4мм
с расстоянием между центрами луночек
5-6 мм.

Количество луночек и их расположение
на стекле могуть быть различными в
зависимости от условий опыта. Объем
используемых ингредиентов 0,02 мл. Реакция
ставится с несколькими контролями.

Для определения антигена вируса вырезают
4
лунки
(см. схему) и каждую из них наливают
соответственно следующие ингредиенты:
специфическая сыворотка, специфический
антиген, нормальная сыворотка, искомый
антиген.

Если искомый интиген соответствует
сыворотке, то между соответствующими
луночками должна появиться линия
преципитации. Линия преципитации должна
также появиться между лунками со
специфической сывороткой и специфическим
антигеном.

Самостоятельная работа студентов.

  1. Изучить
    и зарисовать схему микробиологической
    диагностики ОРВИ.

  2. Зарисовать
    и поставить РГА для индикации вируса.

  3. Изучить
    схему постановки РТГА для идентификации
    выделенного вируса. Учесть результаты,
    дать заключение.

  1. Изучить
    и зарисовать схему микробиологической
    диагностики энтеровирусных инфекций
    (полиомиелита, вирусов Коксаки, ECHO
    и др.).

  2. Зарисовать
    в тетради модель строения вириона
    полиомиелита, обозначить на рисунке
    НК, капсид, капсомеры, нуклеокапсид.

  3. Изучить
    результаты идентификации энтеровирусов
    в реакции нейтрализации со специфическими
    иммунными сыворотками. Дать заключение.
    Зарисовать в тетради схему РБН (реакция
    биологической нейтрализации) для
    идентификации вируса.

  4. Оценить
    результаты титрования вируснейтрализующих
    антител в РБН парными сыворотками. Дать
    заключение.

  5. Разобрать
    схему обнаружения противовирусных
    антител или антигенов с помощью реакции
    преципитации.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицинский взгляд на еду
Adblock
detector