Анализ цитология (слизистая оболочка полости носа, соскоб (мазок)), срок исполнения 5 дней.

Способы забора мазка из носа на цитологию

Высмаркивание секрета. Назальный секрет может быть получен путем простого высмаркивания на предметное стекло, но этот метод нечасто используют в клинической практике, его недостатком является то, что не при всех состояниях в полости носа находится достаточное количество секрета. Метод далеко не всегда применим у детей и пожилых людей.

Забор содержимого тампоном (мазки-перепечатки). Это наиболее распространенный эксфолиативный метод, при котором исследуются лишь свободно лежащие или готовые отторгнуться с поверхности слизистой оболочки клетки.

Секрет, полученный этим методом, содержит только клетки, свободно пребывающие в полости носа и находящиеся непосредственно в эпителиальном слое. Метод прост и атравматичен, его без ущерба для больного можно повторять много раз.

Мазок на цитологию берут ватным тампоном на металлическом аппликаторе. Вата должна быть максимально плотно накручена на зонд и смочена изотоническим раствором.

При заборе тампоном недостаточно взять слизь только из передних отделов или со дна полости носа, так как это не дает представления о реальном клеточном составе секрета.

Необходимо три-четыре раза провести по поверхности нижней и средней носовых раковин, доводя его до задних отделов полости носа. Полученный материал переносят на предметное стекло, прокатывая зонд по его поверхности, но не втирая, так как последнее приводит к большему повреждению клеток.

Аспирация отсосом. Назальный секрет может быть получен путем аспирации так же, как при заборе для микробиологического исследования.

Метод отпечатков. Предметное стекло небольшого размера или тонкую пластиковую полоску, смоченные 1% альбумином для того, чтобы поверхность была липкой, вводят в полость носа и прижимают к слизистой оболочке нижней носовой раковины или перегородки носа.

Этот еще один эксфолиативный метод дает неплохое представление о составе клеточной популяции, но не всегда позволяет собрать достаточное для подсчета количество клеток.

Введение впитывающей губки. С помощью данного метода можно проводить как качественное, так и количественное исследование назального секрета. Для этого в полость носа вводят стандартные полоски поролона или ваты размерами примерно 30x6x3 мм.

Степень намокания тампона и момент его извлечения определяют при передней риноскопии, обычно это время составляет 3-10 минут, для проведения количественных измерений используют фиксированное время, например, 20 минут.

Для исследования лучше получить секрет, не разбавленный слезной жидкостью, которая поступает в нижний носовой ход по носо-слезному каналу. Для этого полоски лучше помещать в область среднего носового хода.

После извлечения содержимое выдавливают из поролона, поместив его между двумя предметными стеклами или в шприц с предварительно извлеченным поршнем. Для лучшего сохранения клеточного материала пропитанный секретом тампон можно поместить на решетку в конической пробирке и отцентрифугировать в течение 20 секунд при небольшом количестве оборотов.

Центрифугат затем гомогенизируют путем встряхивания или размешивания стеклянной палочкой, переносят пипеткой в счетную камеру (например, камеру Фукса-Розенталя) и подсчитывают общее количество клеток.

После этого материал наносят на стекло и готовят препараты для подсчета отдельных видов клеток. Данный метод мазка из носа на цитологию чаще всего используют при аллергическом рините при проведении провокационной интраназальной пробы с аллергенами.

Щеточный метод. Аналогичен методу щеточной биопсии, который используется при бронхоскопии. Материал из полости носа получают при помощи металлической щетки с нейлоновыми щетинками, которую вводят между перегородкой носа и нижней носовой раковиной, делая несколько вращательных движений.

Метод соскоба. Наиболее полноценный морфологический материал для исследования получают путем соскабливания с поверхности исследуемого участка слизистой оболочки нижней или средней носовой раковины пластиковой или металлической кюреткой (например, ложкой Фолькмана) под контролем зрения.

Соскоб следует проводить относительно небольшим индивидуально варьируемым нажимом, так как при сильном нажиме происходит выделение крови и нежелательное попадание эритроцитов в препарат.

Клетки, содержащиеся в соскобе, хорошо сохраняются, и исследование дает хорошее представление о клеточном составе поверхностного слоя эпителия хотя и не всей полости носа, а только исследуемого участка.

Метод смывов (назальный лаваж). Этим методом можно получить наименее поврежденный клеточный материал, он чаще всего используется для иммунологических исследований.

Смыв можно получить, если вести в одну или в обе половины полости носа 5 мл теплого изотонического раствора хлорида натрия или раствора Рингера. Пациента просят запрокинуть голову назад и произносить букву «к» или «ку-ку», чтобы закрыть носоглотку мягким небом и предотвратить вытекание части лаважной жидкости в глотку.

Введенная жидкость должна находиться в полости носа не менее 10 секунд, после чего пациента просят наклонить голову вперед, и выливающуюся из носа жидкость собирают в лоток и переносят в пробирку.

Пробирку центрифугируют в течение 15 минут при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость сливают и используют для иммунологических или биохимических исследований, а сам осадок — для подсчета клеточных элементов.

При другой методике назального лаважа материал получают, омывая слизистую оболочку носа при помощи устройства, состоящего из мерной пробирки без дна, носовой оливы и соединяющей их трубки.

Подняв пробирку вверх, оливу вставляют в ноздрю при наклоненной вперед голове, после чего в пробирку наливают 10 мл изотонического раствора. При опускании пробирки жидкость по закону сообщающихся сосудов поступает в полость носа.

Совершив 5 качательных движений, пробирку опять поднимают вверх, собирают лаважную жидкость. Полученный смыв центрифугируют, сливают надосадочную жидкость и исследуют осадок под микроскопом.

Так же как и при сборе назального секрета поролоновым тампоном, смывы позволяют не только изучать клеточный состав назального секрета, но и подсчитывать количество клеток в кубическом сантиметре мазка на цитологию носа.

Исследование слизи (секрета) из носовой полости

Исследование слизи из носа помогает диагностировать аллергические заболевания полости носа и околоносовых пазух.

В норме отношение эозинофилов к нейтрофилам в секрете из полости носа составляет 1:10 или же эозинофильные лейкоциты не обнаруживаются вовсе. При аллергических процессах в слизистой верхних дыхательных путей концентрация эозинофилов в секрете носовой полости возрастает в зависимости от типа аллергена, вида аллергической реакции, стадии заболевания.

Исследование секрета носовой полости позволяет дифференцировать вазомоторный и аллергический ринит — эозинофилия свойственна аллергическим ринитам (эозинофилия в секрете из полости носа — важный диагностический признак респираторных аллергозов).

В период обострения аллергического ринита в секрете носовой полости обнаруживаются тучные клетки и эозинофилы в большом количестве — нарастание клеток идет параллельно, а в период ремиссии их число снижается, причем эозинофилов больше, чем тучных клеток.

Обработка материала для мазка на цитологию

Для приготовления цитологических препаратов используют обезжиренные предметные стекла. Материал, равномерно распределяют на предметном стекле, «прокатывая» по нему тампон при методе мазков-перепечатков или небольшим шлифованным стеклом при слабом нажиме.

Мазки высушивают на воздухе либо фиксируют буферным раствором формалина или 95% алкоголем, после чего окрашивают по гематологической методике, которую выбирают в зависимости от особенностей изучаемого материала.

Так, окраска по Романовскому-Гимзе хорошо выявляет эозинофилы, нейтрофилы и базофилы, по Май-Грюнвальду — нейтрофилы, окраска толуидиновым синим — преимущественно базофилы.

И. Л. Теодор рекомендует следующий способ: после высушивания на воздухе мазки помещают в краситель-фиксатор Май-Грюнвальда на 3 минуты, после чего отмывают проточной водой с обратной стороны стекла и докрашивают в течение 10-15 минут по методу Романовского.

Препараты можно микроскопировать и сразу после фиксации в красителе Май-Грюнвальда, однако структура клеток и ядер четко выявляется только после докрашивания по методу Романовского.

Микроскопическое исследование мазка со слизистой оболочки носа

Риноцитограмма – это исследование слизи из полости носа под микроскопом. Оно позволяет определить наличие в носовой слизи клеток, характерных для аллергических или инфекционных заболеваний, вызывающих ринит – воспаление слизистой оболочки носа.

При длительном насморке в некоторых случаях определение вызвавшей его причины бывает затруднено. С этой целью и проводится риноцитограмма, которая позволяет выявить увеличенное количество эозинофилов, что служит дополнительным аргументом в пользу аллергической природы насморка.

Референсные значения не приводятся.

Результат представляет собой описание общей цитологической картины с подсчетом количества лейкоцитов, эозинофилов, нейтрофилов, эпителия мерцательного, лимфоцитов, макрофагов, слизи, эритроцитов, дрожжевых грибов, флоры.

Риноцитограмма, цитологическое исследование секрета из полости носа, мазок на эозинофилию, исследование соскоба со слизистой оболочки полости носа, исследование назального секрета.

Cytologic study of respiratory tract, Nasal Smear, Nasal smear for eosinophils, Eosinophil smear.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить использование назальных спреев, капель, содержащих кортикостероиды, в течение 24 часов до анализа.

Общая информация об исследовании

Риноцитограмма – исследование выделений из носа под микроскопом. С ее помощью можно выявить изменения, характерные для аллергических реакций организма или для инфекции.

В норме все стенки полости носа покрыты слизистой оболочкой с секретом, способствующим удалению пыли и микробов. Секрет обладает таким свойством благодаря наличию мерцательного эпителия, имеющего реснички, которые способны колебаться и перемещать слизь вместе с пылью и микробами.

Тем не менее в норме в полости носа обитает большое количество микробов (некоторые виды стафилококков, стрептококков и др), не причиняющих человеку вреда из-за иммунного ответа организма.

Если по каким-либо причинам местный иммунитет снижается, микробы могут приводить к воспалению, возникает острый ринит – расстройство функции носа, сопровождающееся воспалительными изменениями слизистой оболочки и насморком.

Снижение местного иммунитета может быть вызвано переохлаждением организма, снижением общего иммунитета человека. Развитию насморка также способствует замедление движения мерцательного эпителия.

В результате ответа иммунной системы в слизистой носа повышается количество лейкоцитов – белых кровяных телец. Существует несколько их разновидностей, при бактериальных инфекциях главную роль в защите организма играют нейтрофилы, при вирусных – лимфоциты. Также могут появляться макрофаги.

При аллергии на организм воздействует определенное вещество (аллерген), например пыльца, шерсть, пыль и т. д., к которому возникает повышенная чувствительность иммунной системы.

Такая реакция приводит к выделению в слизистой оболочке носа определенных веществ (гистамина, брадикинина), вызывающих симптомы аллергии. При этом большее значение в данном процессе имеют такие клетки иммунной системы, как эозинофилы (одна из разновидностей лейкоцитов).

Кроме того, существует вазомоторный (нейровегетативный) ринит, при котором воздействие холода, прием некоторых лекарств, воздействие других физических или психоэмоциональных факторов вызывает острое набухание слизистой оболочки носа и изменение тонуса сосудов носовой полости.

При этом во всех случаях ринита происходит образование и выделение большого количества жидкости, что мы и называем насморком.

Аллергическая природа ринита часто остается невыявленной, хотя она достаточно распространена. Риноцитограмма может помочь в диагностике: особенность эозинофилов, появляющихся при аллергическом рините, состоит в том, что при специальной окраске (по Романовскому – Гимзе) они окрашиваются в красный цвет и становятся доступными для подсчета под микроскопом.

Для чего используется исследование?

При длительном насморке в некоторых случаях определение вызвавшей его причины бывает затруднено. С этой целью и проводится риноцитограмма, которая позволяет выявить увеличенное количество эозинофилов, что служит дополнительным аргументом в пользу аллергической природы насморка.

Когда назначается исследование?

При длительном насморке (несколько недель и более), сопровождающемся заложенностью носа, чиханием неустановленного происхождения.

Референсные значения для различных видов микроорганизмов зависят от их локализации (точки взятия биологического материала).

    Эозинофилы. Значительное повышение (более 10 % от общего количества лейкоцитов в мазке и более) количества эозинофилов свидетельствует в пользу аллергического происхождения насморка. В то же время следует иметь в виду, что отсутствие большого количества эозинофилов в мазке не позволяет достоверно исключить аллергическую природу заболевания. Уровень эозинофилов также может быть повышен при неаллергическом эозинофильном рините – заболевании, при котором другие признаки (помимо повышения количества эозинофилов в крови и носовой слизи) аллергии отсутствуют. Заболевание часто сопровождается полипами и отсутствием реакции на противоаллергические (антигистаминные) препараты.
    Нейтрофилы. Увеличение количества данных клеток в мазке может указывать на то, что причиной насморка являются инфекционные агенты (бактерии или вирусы). Повышение уровня нейтрофилов особенно характерно для острой стадии заболевания. Лимфоциты. Повышенное содержание лимфоцитов может быть связано с хроническим инфекционным воспалением слизистой оболочки носа. Эритроциты. Появление в мазке эритроцитов может свидетельствовать о повышенной проницаемости сосудистой стенки слизистой полости носа, что характерно для некоторых видов ринита, в частности вызванных дифтерией или гриппом.

Следует отметить, что повышение уровня нейтрофилов и лимфоцитов не является специфичным в отношении инфекции.

Отсутствие в мазке эозинофилов, нейтрофилов, других видов лейкоцитов может указывать на:

    вазомоторный ринит – насморк, не связанный с аллергией или инфекцией; ринит, связанный со злоупотреблением сосудосуживающими назальными спреями; ринит, вызванный другими причинами (гормональными нарушениями, нарушениями психоэмоционального состояния, нарушениями анатомии носовых ходов и др.).

Что может влиять на результат?

Использование назальных спреев, особенно кортикостероидов, может приводить к ложноотрицательным результатам в отношении эозинофилии.

Тот же эффект иногда наблюдается при использовании таблеток, содержащих кортикостероиды, и антигистаминных (противоаллергических) препаратов.

    Следует оценивать результаты исследования, сопоставляя данные истории развития заболевания, других исследований и симптомы. Для повышения достоверности результатов рекомендуется повторить обследование через 1-2 недели.

Кто назначает исследование?

Врач-терапевт, врач общей практики, врач-оториноларинголог, аллерголог-иммунолог.

    Пальчун В. Т. Оториноларингология. Национальное руководство, 2008, ГЭОТАР-медиа. 919 с. V Paleri, J Hill. ENT Infections: An Atlas of Investigation and Management, 2010, Atlas Medical Publishing Ltd. P. 116. Dan L. Longo, Dennis L. Kasper, J. Larry Jameson, Anthony S. Fauci, Harrison’s principles of internal medicine (18th ed.). New York: McGraw-Hill Medical Publishing Division, 2011.

//doktorland. ru/citologiya nosovogo sekreta. html

//www. diabet-gipertonia. ru/analiz/34 4 sliz iz nosa. html

//helix. ru/kb/item/908

//surgeryzone. net/info/informaciya-po-otolaringologii/mazok-iz-nosa-na-citologiyu. html

//helix. ru/kb/item/02-033

Результаты мазка из носа на цитологию

Для аллергического ринита типично повышенное содержание эозинофилов (свыше 10% от общего количества клеток) и появление базофильных клеток. При респираторных вирусных инфекциях обычно отмечаются полиморфизм клеточного материала и большое количество слущенных клеток мерцательного эпителия в различных стадиях дегенерации.

С развитием острого бактериального воспаления слизистой оболочки начинают преобладать полинуклеарные нейтрофилы, которые обычно сплошь покрывают поля зрения, определяются эритроциты и большое количество фагоцитированных и свободных бактерий.

При хроническом инфекционном рините и риносинусите в значительных количествах могут быть обнаружены лимфоциты и макрофаги. Присутствие мицелия или спор указывает на возможную грибковую этиологию ринита.

При атрофическом рините выявляется скудное количество клеток эпителия, зато появляется большое количество метаплазированных элементов и клеток плоского эпителия, много нейтрофилов и бактерий, в числе которых присутствуют и клебсиеллы.

Сравнительные исследования показали, что показатели общего количества и процентного состава эозинофилов и нейтрофилов, полученные методами соскобов и смывов довольно хорошо коррелируют между собой, особенно при провокационном тесте у больных аллергическим ринитом.

В дополнение к основной методике исследования окрашенных препаратов мазков из носа на цитологию может быть использована люминесцентная микроскопия. Характер люминесценции обусловлен химическим составом клеток и позволяет судить, в частности, о степени зрелости клеточных элементов.

Биопсия из носа

Образцы слизистой оболочки полости носа для гистологического исследования могут легко быть получены в амбулаторных условиях путем инструментальной биопсии.

Небольшие кусочки слизистой берут при помощи ушных режущих (а не рвущих!) щипцов с переднего конца нижней или средней носовой раковин. Обычной окраски гематоксилином-эозином достаточно для изучения клеточного состава ткани.

Считают, что исследование биопсийного материала более информативно, чем исследование мазков и смывов, особенно при определении процентного представительства эозинофилов, например, при дифференциальной диагностике различных форм аллергического и неаллергического ринита.

Цитология носового секрета и ее клиническая трактовка недостаточно широко внедрены в практику лечебных учреждений. Вместе с тем, данный метод исследования достаточно информативен, так как клеточный состав носового секрета обычно отражает особенности патологического процесса в полости носа и во многих случаях дополняет данные эндоскопического исследования, дает возможность уточнить морфологический диагноз, от которого зависит выбор и результаты лечения.

Цитограммы носового секрета являются достоверным диагностическим критерием аллергического состояния слизистой оболочки полости носа. По данным исследований, сочетание эозинофилии и наличия базофильных клеток (более 10 в поле зрения) в мазках из полости носа отмечается у 94% больных с постоянной формой аллергического ринита и у 74% больных с сезонным аллергическим ринитом.

Диагностическую ценность при определении аллергии наряду с радиоаллергосорбентным и провокационным тестами представляет определение степени дегрануляции базофильных гранулоцитов.

Наиболее простым способом цитологии носового секрета является метод мазков-отпечатков, а также метод получения носового секрета, заключающийся в стимуляции секреции целлюлозной губкой, введенной в полость носа с последующей аспирацией секрета.

Однако носовой секрет представляет негомогенную вязкую жидкость с неравномерным распределением в ней клеточных элементов, поэтому проведение точных количественных цитологических исследований в этих условиях практически осуществить невозможно.

Гомогенизация носового секрета является обязательным, главенствующим методологическим приемом обеспечения всех дальнейших условий стандартизации методики.

Методика цитологии носового секрета: в центрифужную мерную пробирку отбирают 0,5 мл носового секрета, который разводят в соотношении 1:1 2,5% раствором димексида, легко проникающего в ткани и обеспечивающего хорошую сохранность клеточных структур исследуемого материала.

Смесь встряхивают в течение 2-3 минут, центрифугируют 15 минут при скорости 3000 об/мин. Затем из 0,1 мл клеточного осадка на двух предметных стеклах готовятся мазки.

На одно стекло наносят 0,05 мл и клеточный осадок распределяют равномерно по всей поверхности стекол путем смещения их относительно друг друга (толщина клеточного слоя на одном стекле составляет 50 мкм).

Техника подсчета. Подсчет клеток производится с помощью квадратно-сетчатого окуляра при увеличении в 200 раз (окуляр — 10, объектив — 20) или 280 (окуляр — 7, объектив — 40).

Для обеспечения точности количественной оценки клеточного состава в препарате (%) необходимо произвести подсчет не менее 200 клеток. С этой целью подбирают количество полей зрения (m) по таблице из расчета: m = 200/n.

Поля зрения, необходимые для подсчета заданного числа клеток, выбирают по двум диагоналям предметного стекла, что обеспечивает нивелирование ошибок, обусловленных неравномерным распределением клеточных элементов на поверхности стекла.

Количество полей зрения зависит от числа клеток в первом случайном поле зрения. Для определения количества клеток в 1 мм куб. носового секрета (N) общее количество клеток (nk) умножают на коэффициент (К): N = K*nk.

Коэффициент рассчитывают следующим образом: площадь 1 поля зрения при увеличении 200 составляет 40000 мкм кв., толщина мазка — 50 мкм, объем среды в одном поле зрения (V) — 2 млн. мкм куб.

В зависимости от количества полей зрения (m) рассчитывают объем исследованной среды, т. е. тот объем, в котором насчитывают nk клеток (V = m*Vk), количество клеток в 1 мм куб. (N) рассчитывают по формуле: N = K*nk, где K = 1/V.

Из этого же числа N затем подсчитывают клеточный состав клеток мазка (%).

Предложенный способ цитологии носового секрета дает возможность получить адекватную оценку его количественного и качественного состава.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицинский взгляд на еду
Adblock
detector