Цитология и жидкостная цитология различие

Метод жидкостной цитологии: диагностируем наличие или отсутствия рака шейки матки без ошибок

Ранняя диагностика неоплазий и рака шейки матки – важнейшее направление современной гинекологии. При этом основным методом скрининга является цитологическое исследование.

Материал для него чаще всего берут с помощью мазка или прицельной биопсии. Такой традиционный способ технически несложен, но дает до 40% ложноотрицательных результатов.

А это означает, что существует риск несвоевременного выявления рака шейки матки даже у проходящих регулярные профилактически осмотры женщин.

Метод жидкостной цитологии – более современный и информативный вариант скрининга с помощью теста по Папаниколау (ПАП-теста).

Несмотря на недавнее введение в клиническую практику, он уже признан наиболее эффективным способом ранней диагностики рака шейки матки.

Ведь результативность высокотехнологичной жидкостной цитологии достигает 95%, тогда как чувствительность традиционной методики составляет в среднем 60%, а в некоторых случаях не превышает и 40%.

Бытует мнение, что регулярное онкогинекологическое обследование необходимо проходить только женщинам, приближающимся к преклимактерическому периоду. Но это не так.

Согласно современным клиническим рекомендациями, скрининг рака шейки матки с проведением цитологического исследования рекомендован всем женщинам с 21 года.

Так что раннее вступление в интимную жизнь – основание для раннего начала профилактических гинекологических осмотров.

В первые 2 года скрининг на рак шейки матки проводят ежегодно.

Поводом для учащения онкогинекологических обследований является появление у женщины фоновых и предраковых заболеваний шейки матки.

При этом пациентку относят к группе высокого риска по развитию рака, а цитологическое исследование гинекологических мазков проводят ей ежегодно.

Дополнительные скрининговые мероприятия осуществляют в период подготовки женщины к зачатию.

Жидкостная цитология при беременности производится по строгим показаниям.

Следует помнить, что такой анализ повышает вероятность угрозы прерывания беременности и может потребовать мер, направленных на нормализацию маточного тонуса.

Цитология и жидкостная цитология различие

Подготовка к жидкостной цитологии шейки матки начинается за 2-3 дня до теста и включает:

  • половой покой;
  • отказ от спринцеваний;
  • прекращение использования любых средств для вагинального введения (свечей, таблеток, спреев).

Когда лучше делать скрининг?

Цитологическое исследование не проводят во время менструации, за 5 дней до нее и 5 дней после. Предпочтение отдается первой половине менструального цикла, хотя эта рекомендация не является строгой.

Если пациентке была проведена кольпоскопия, цитологическое исследование допустимо не ранее чем через 24 часа после нее. А в случае биопсии шейки матки – лишь по истечении 3 недель.

В настоящее время в клинической практике используются несколько технологических вариантов жидкостной цитологии.

цитология и жидкостная цитология различие

Наиболее известной и востребованной из них является Becton Dickinson (BD) Sure Path™, которая была одобрена FDA в США в 1999 году, с 2004 года официально одобрена NICE в Великобритании.

С этого времени она активно внедряется в повседневную клиническую практику в странах Европы, РФ и ближнего зарубежья.

Основными этапами этого исследования являются:

  1. Забор материала. Для этого используется специально разработанная комбинированная цитощетка особой конструкции. Ее аккуратно вводят в цервикальный канал, после чего совершают вращательные движения (2 против движения часовой стрелки и 3 по ее ходу). Это обеспечивает максимально возможное и при этом малотравматичное получение поверхностно расположенных клеток слизистой оболочки шейки матки – с ее влагалищной части, из цервикального канала и прилегающих участков влагалища. Такая манипуляция не требует анестезии, ведь испытываемые женщиной ощущения не превышают болевой порог.
  2. Помещение цитощетки с полученным материалом в специальную пробирку (флакон) с особой жидкостью, что и дало название методике. Такая среда не только обладает консервирующими и стабилизирующими свойствами, но и способствует образованию суспензии с равномерным распределением клеток и других элементов по всему объему. Пробирки транспортируются в лабораторию, имеющую лицензию на проведение жидкостной цитологии и соответственно оснащенную.
  3. Автоматизированная подготовка цитопрепарата. Включает вакуумную фильтрацию порции суспензии из пробирки, центрифугирование, нанесение полученного клеточного осадка равномерным слоем на стекло-слайд, окраску по методу Папаниколау с использованием влажной фиксации.
  4. Микроскопия цитопрепарата. ПАП-тест на основе жидкостной цитологии осуществляется по тем же принципам, что и в случае традиционной методики. Но при этом учитываются особенности окраски, положения и размеров клеток после влажной фиксации цитопрепарата. Именно поэтому исследование может проводиться только прошедшим специальное обучение сертифицированным врачом-лаборантом.

Расшифровка результатов анализа производится только гинекологом или онкологом. Ответ из лаборатории может быть получен через 5-10 дней после забора материала. Но нередко этот срок удлиняется до 2-3 недель.

Скорость получения ответа зависит от времени транспортировки, загруженности лаборатории и способа информирования поликлинического звена о данных проведенных исследований.

При необходимости проводят экспресс-исследование, в этом случае врач узнает результат уже в течение первых 24 часов.

Схема проведения жидкостной цитологии шейки матки

А что после исследования?

В течение 1,5 недель рекомендуется выдерживать половой покой, отказаться от использования вагинальных тампонов и спринцеваний.

В первые дни после теста допустимы необильные кровянистые выделения из влагалища, поэтому женщине желательно пользоваться гигиеническими прокладками.

Повышение температуры тела, продолжительные или обильные кровянистые выделения, боли внизу живота – тревожный признак. Появление таких симптомов требует скорейшего обращения к врачу.

К ключевым различиям этих скрининговых методик относят:

  • При обычном цитологическом исследовании образцы тканей забирают прицельно, участки для исследования выбирается врачом на основании визуальных изменений слизистой оболочки. В случае жидкостной методики материал у любой женщины получают со всей окружности шейки матки. Это существенно снижает вероятность, что какой-либо измененный участок будет пропущен.
  • При проведении обычной цитологии биоматериал перед отправкой высушивают на стекле в условиях комнатной температуры. А при жидкостной цитологии его помещают в особую пробирку (флакон) со специальной стабилизирующей средой, что продлевает допустимый срок транспортировки и хранения полученного образца. Помещенный в пробирку биоматериал пригоден для исследования в течение нескольких месяцев и не требует создания особых условий.
  • При традиционной методике не проводится фильтрация. Поэтому при наличии в мазке воспалительных элементов, большого количества слизи и других примесей результат цитологического исследования оказывается недостаточно достоверным и обычно требует повторного проведения ПАП-теста после лечения. Этого недостатка лишена жидкостная методика.
  • При традиционной методике далеко не весь объем полученной ткани попадает на стекло и подвергается последующему исследованию. До 35-40% клеток остается на инструменте и перчатках врача. Это создает вероятность, что имеющиеся озлокачествляющиеся ткани останутся не диагностированными. При жидкостной методике такой потери биоматериала не происходит. Это обеспечивается помещением цитощетки в стабилизирующую и суспензирующую среду, последующим автоматизированным центрифугированием образца и формированием специального цитопрепарата со стандартизированным ровным слоем клеток на стекле-слайде.
  • При традиционном взятии мазка на онкоцитологию клетки на предметно стекле располагаются обычно в несколько слоев, накладываясь друг на друга и тем самым ухудшая визуализацию. Жидкостная цитология bd shurepath лишена этого недостатка, получаемый цитопрепарат является монослойным.
  • Возможность проведения повторного анализа того же биоматериала или других исследований при использовании жидкостной цитологии. Ведь суспензия в пробирке не теряет своих свойств в течение нескольких месяцев, а ее объема достаточно для получения нескольких цитопрепаратов. При традиционной методике исследуемые ткани ничем не защищены, и имеется высокий риск их повреждения при хранении.

В целом жидкостная цитология с использованием автоматического скрининга является существенно более информативной методикой по сравнению с традиционным забором мазков с шейки матки на онкоцитологию.

И основное ее достоинство – малый процент ложноотрицательных результатов онкогинекологического скрининга, что обеспечивается прогрессивными технологическими особенностями теста при строгом соблюдении правил забора биоматериала.

Жидкостной цитологический скрининг направлен на выявление разнообразных клеточных атипий, что показывает наличие у женщины предракового состояния или рака шейки матки.

Однослойность и однородность цитопрепарата обеспечивают высокую степень визуализации, позволяя врачу-лаборанту достоверно определять характер изменений.

Это минимизирует вероятность диагностических ошибок и ложноотрицательных результатов.

Наличие суспензии и ее достаточный объем позволяют по показаниям дополнительно проводить другие исследования:

  • анализ на онкомаркеры;
  • любые ПЦР-исследования;
  • ВПЧ-тестирование;
  • иммуноцитохимические исследования с определением маркеров пролиферации.

Но жидкостная цитология не позволяет диагностировать воспалительные состояния, ведь обязательный этап фильтрации удаляет из суспензии детрит, лейкоциты и другие примеси.

Поэтому при подозрении на цервицит и кольпит целесообразно параллельное взятие традиционного мазка на онкоцитологию. Это является существенным недостатком методики.

Чем является?

Это инновация в сфере обследования женских половых органов на атипичные клетки. Цитология с латинского раскладывается, как «цито»-клетка, «логи»-исследовать.

Название говорит само за себя. При заборе анализа обследуют строение клеток. Такой тест дает минимум ложно — положительных либо ложно -отрицательных ответов.

Благодаря цитологии было спасено немало жизней. Ведь именно этот анализ позволяет на начальном этапе определить, что у женщины развиваются атипичные клетки. А чем раньше обнаружат рак, тем выше вероятность того, что его излечат.

Поговорим о приставке «жидкостная». После забора материала образцы отправляют в жидкую среду. Далее образцы отправляют в специальную центрифугу, где все клетки отделяются ровным слоем.

Этот слой кладут на стекло и начинают обследование под микроскопом. Данный метод цитологии шейки матки при помощи жидкости дает высокий результат по сравнению с тем, когда биоматериал сразу кладут на стекло, не отправляя в центрифугу.

Результаты диагностики и их расшифровка

Ранняя диагностика рака шейки матки методом жидкостной цитологии

Ключевые слова: рак шейки матки, жидкостная цитология, скрининг

cervical cancer, liquid-based cytology, screening

Казаишвили Т.Н.

ГБУЗ «Центр специализированных видов медицинской помощи имени В.П. Аваева» (Тверь, Россия) 170006, Россия, Тверская область, Тверь, ул. Софьи Перовской, 56 E-mail: tkaza@bk.ru

Early diagnosis of cervical cancer by liquid-based cytology

Kazaishvili T.N.

SBOH «V. Avaev Center of specialized types of medical care» (Tver, Russia) 56, ul. Sofii Perovskoy, Tver, Tverskaya oblast, 170006, Russia E-mail: tkaza@bk.ru

Резюме

Рак шейки матки – одна из наиболее распространенных онкологических патологий.

В этой статье мы сравнили два метода цитологического исследования: традиционную и жидкостную цитологию.

Метод жидкостной цитологии является более информативным и может использоваться как самостоятельный скрининговый метод выявления заболеваний шейки матки.

Abstract

Uterus cervix cancer is one of the most widespread oncological pathologies among the female population.

In this article we compared two methods of cytologic research of material from a uterus cervix: traditional and liquid cytology.

Рак шейки матки (РШМ) занимает второе место в структуре онкологической патологии среди женского населения в мире. Ежегодно регистрируется около 500 тыс. новых случаев рака шейки матки и около 250 тыс. смертельных исходов.

За последние 10 лет заболеваемость раком шейки матки в России возросла на 26%. Показатель запущенности в 2013 г. составил 36%, то есть больше трети больных обращаются уже на III, IV стадиях, когда лечение неэффективно.

Одногодичная летальность от рака шейки матки составляет 16%.

Несмотря на визуальность формы и длительный период предрака с возможностью ранней диагностики и высокоэффективного несложного органосохраняюще-го лечения, заболевание часто диагностируется на этапе глубоко инвазивного процесса, предполагающего калечащее лечение без гарантий выздоровления.

Это свидетельствует об объективных нераскрытых трудностях диагностики, приводящих к расхождениям результатов диагностических тестов, их невысокой чувствительности и воспроизводимости.

Для максимальной оптимизации диагностики цер-викальной патологии и избежания субъективной интра-операционной оценки локализации и размеров участка неоплазии необходимо применение современных и внедрение новых уточняющих методов диагностики.

В настоящее время все большее распространение получает высокоэффективный метод жидкостной цитологии, который позволяет получить тонкий репрезентативный моно-слойный препарат с минимальным содержанием крови, бактерий и нейтрофильных лейкоцитов.

Влажная фиксация усиливает четкость структур, распространенные артефакты при этом отсутствуют.

онкогенной направленности от воспалительной. Чувствительность цитологического метода при применении ЖЦ возрастает до 85% и до 96% в отдельных лабораториях.

Цель исследования – совершенствование диагностики доброкачественных, предраковых заболеваний и рака шейки матки, сопоставление традиционной и жидкостной цитологии в диагностике цервикальной патологии.

За период с 2014 по 2015 гг. на базе ГБУЗ Центра им. В. П. Аваева г.

Твери было проведено 4560 исследований цервикальных образцов, параллельно традиционным методом и методом жидкостной цитологии с приготовлением и окраской цитологического препарата по методике BD Surepath c автоматизированной системой просмотра цитологических препаратов BD Focal Point GS.

Возраст пациенток составил от 18 до 65 лет. Интерпретация цитологической картины производилась согласно общепринятым критериям оценки состояния эпителия по Bethesda System,1999.

Таким образом, точность метода жидкостной цитологии существенно выше по сравнению с традиционным

методом. Метод жидкостной цитологии в скрининге рака шейки матки продемонстрировал возможность выявления патологического процесса на ранних этапах его развития, проведения мониторинга опухолевого процесса,

что определяет своевременность применения правильной тактики лечения. ЖЦ может использоваться как самостоятельный высокоинформативный скрининговый метод выявления заболеваний шейки матки.

Список литературы

2. Новик В. И. Эпидемиология рака шейки матки, факторы риска, скрининг. Практическая онкология. 2002; 3: 156-166.

3. Онкология: национальное руководство. Под ред. Чиссова В. И., Давыдова М. И. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.

ГАЛАВИТ – иммуномодулятор с доказанным противовоспалительным действием

Подробно о Галавит для врачей

«Медицинский совет. Генекология» 2015

В.Н. Прилепская, д.м.н., профессор, Г.Р. Байрамова, д.м.н., Е.А. Коган, д.м.н., профессор, В.Ф. Чернова, А.Н. Окушко, к.м.н. Научный Центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова Минздрава России, Москва

В данном обзоре рассматривается взаимосвязь вируса папилломы человека и его роль в развитии цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN) и рака шейки матки.

Представлены данные о наиболее информативных методах диагностики (иммуногистохимические, молекулярно-генетические и др.

) и лечения ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки.

В России в 2012 г. число новых случаев РШМ составило 15 342 (6,3%), смертность от рака шейки матки – 7 371 (5,3%) случаев [1]. В последние годы РШМ все чаще встречается в молодом возрасте.

По данным ВОЗ, заболеваемость РШМ в возрастной группе 15-39 лет в мире составила 111 503 случая, в России – 3 954, в группе 40-44 года – 66 308 и 1 564 случая соответственно [1].

По данным ряда исследований, РШМ у женщин в возрасте 30-39 лет составляет 78%, в возрасте 20-29 лет – 21% и только в 1% случаев диагностирован в возрасте моложе 20 лет [3].

Почти в 100% случаев у больных РШМ, подтвержденным гистологическим методом исследования, выявляется вирус папилломы человека (ВПЧ) высокоонкогенных типов.

По данным C.M. Wheeler и соавт. (2006) через 3 года после инфицирования ВПЧ CIN II-III развивается у каждой четвертой женщины (27%) [5]. В России папилломавирусная инфекция диагностируется у 15,5% женщин, в США – у 28,6%, в Европе – 2-12% [6].

Вирус папилломы человека – ДНК-содержащий вирус, в состав которого входят два структурных гена (L1 и L2) и семь функциональных генов (E17). Известно более 200 типов ВПЧ, более 40 из них способны поражать слизистые оболочки половых органов [7].

(2015) [8] показали, что у женщин с гистологически верифицированным диагнозом CIN 3 в 63,6% случаев выявляется ВПЧ 16 типа, в 7% – ВПЧ 33 типа, в 6,2% случаев – ВПЧ 18 типа и в 5,4% – ВПЧ 31 типа.

Вместе с тем авторы показали, что ВПЧ 16 типа чаще встречается в возрасте до 35 лет [8]. В ряде исследований показано, что в 70% случаев инвазивный РШМ обусловлен ВПЧ 16 и 18 типов [9].

Эпидемиологические и молекулярно-биологические данные указывают на важную роль вируса папилломы человека в возникновении цервикальных интраэпителиальных неоплазий и рака шейки матки. Почти в 100% случаев у больных РШМ, подтвержденным гистологическим методом исследования, выявляется вирус папилломы человека высокоонкогенных типов

Особенностью ВПЧ-инфекции является тот факт, что в силу эпителиотропности вируса он не обнаруживается в крови, а выработка антител иммунной системой отмечается далеко не у всех инфицированных больных [10].

При этом уровень антител очень низок и не способен обеспечить длительный и надежный иммунитет.

  1. Наблюдаться у гинеколога. Один раз в год обязательно проходить осмотр у гинеколога с обязательным осмотром шейки матки  — кольпоскопией.
  2. Простого осмотра шейки матки недостаточно — необходимо сделать определенные анализы. То есть ответить на два вопроса: есть ли у вас вирус папилломы человека, и есть ли в клетках шейки матки изменения, которые могут потенциально привести к развитию рака шейки матки. Чаще всего в обычных клиниках и лабораториях берут простой цитологический мазок и мазок методом ПЦР на определение вируса (то есть анализ, который просто ответит на вопрос — есть этот вирус или нет).  У этих анализов есть несколько существенных недостатков, которые могут существенно влиять на их точность.
  3. После 65 лет также необходимо регулярно проходить скрининг на рак шейки матки. К нему, в большинстве случаев, приводит заражение вирусом папилломы человека. Причем, возбудитель мог попасть в организм даже во время сексуальных контактов 10-летней давности, «дремать» в течение длительного времени, а затем привести к развитию злокачественной опухоли. В том случае, если женщина в пожилом возрасте продолжает ежегодно проходить проверку на предрасположенность к раку шейки матки, возможность «вовремя» поймать болезнь и вылечиться от нее повышается в несколько десятков раз.

Противопоказания

Противопоказания к процедуре:

  • острые инфекции органов репродуктивной системы;
  • беременность;
  • менструация.

После рождения ребенка проводить манипуляцию можно не раньше, чем по истечению 3 месяцев.

Как и все в этом мире, цитология жидкостная шейки матки имеет положительные и отрицательные стороны. Конечно, данный метод обладает высокой информативность, по сравнению с обычным анализом на цитологию.

«За» жидкостной цитологии «Против» жидкостной цитологии
1)    Биоматериал, взятый из шейки матки, отлично очищен от примесей (кровь, эпителий) благодаря центрифуге. Конечный результат выходит чистый, и исследование дает высокий результат. 1)    Иногда примеси содержат важную информацию о здоровье женщины. Поэтому полное их удаление возможно смажет картину конечного результата.
2)    Данное исследование обладает повышенной чувствительностью к развивающейся атипии на шейке матки. 2)    Из-за агрессивной обработки биоматериала некоторые клетки могут деформироваться.
3)    При жидкостной цитологии есть возможность длительного хранения забранного материала в специальной жидкости. Более того, из этого материала можно сделать еще несколько повторных исследований.  3) Длительное хранение требует дорогостоящих аппаратов, поэтому не все клиники в состоянии позволить себе этот метод исследования.
4)    Забранный материал при помощи данной методики можно применить не только для цитологии, но и для исследований на другие заболевания, например, ВПЧ.

Как видим, плюсов значительно больше у данного исследования шейки матки, нежели минусов.

Противопоказания

Назначить диагностику таким методом целесообразно при подозрении на онкологические заболевания. Процедура позволит определить наличие атипичных клеток, степень поражения.

Показания для жидкостной цитологии шейки матки:

  • планирование беременности;
  • частая смена половых партнеров;
  • нарушение менструального цикла;
  • лишний вес, диабет, метаболический синдром;
  • вирусные заболевания репродуктивной системы, в частности, ВПЧ;
  • прием противозачаточных препаратов;
  • изменение характера выделений;
  • подбор способа предохранения (противозачаточных таблеток, внутриматочной спирали).

Когда лучше делать жидкостную цитологию шейки матки? Мазок для исследования берут в период первых семи дней после менструации.

Результат исследования может быть 2 видов: отрицательный (или нормальный) — указывает на отсутствие патологических изменений и положительным (или патологическим) — в материале выявлены атипичные клетки, которые могут быть предвестниками онкологических болезней.

Главный показатель забора материала с шейки матки для цитологии это подозрение на онкозаболевание. Результатом теста будет показатель присутствия раковых клеток и степень их развития.

В первую очередь обследуют женщин, которые находятся в группе риска заболеваний раком. Помимо этого фактора есть еще ряд ситуаций, при которых показан этот анализ.

  • Планирование родить ребенка;
  • Различные сбои в течение менструального цикла (ранние менструации, задерживающиеся, обильные кровотечения);
  • Невозможность забеременеть;
  • Количество половых партнеров превышает одного;
  • Вирусные заболевания;
  • Длительный срок приема гормональных контрацептивов;
  • Влагалищные выделения не ясной этиологии;
  • Предварительные меры перед введением внутриматочной спирали.

Данный тест следует проходить всем женщинам, живущим половой жизнью, в возрасте от 18 до 65 лет. Даже если у женщины наступил период менопаузы, ведь в это время большой риск заболеть онкологическими заболеваниями.

Аппарат для жидкостной цитологии являет собой процессор, который работает на основании установленной программы. На стекло-слайд лаборант наносит биоматериал.

Прежде чем начать жидкостную цитологию весь материал побывает в центрифуге. Там основные клетки отделятся от примесей, и материал будет доступен для скрупулезного изучения на присутствие атипичных клеток.

Поэтому, для того, чтобы провести жидкостную цитологию шейки матки понадобятся такие инструменты:

  • Гинекологическое кресло;
  • Зеркало;
  • Особая щеточка;
  • Капсула с жидкостью, куда опускается щеточка;
  • Запрограммированный аппарат для исследования.

Все эти инструменты изображены на картинке ниже.

Рассмотрим процесс проведения жидкостной цитологии по шагам, которые будет предпринимать доктор.

  1. Женщина оголяется ниже пояса и занимает удобное положение на гинекологическом кресле.
  2. Доктор использует зеркало, чтобы открыть доступ к шейке матки.
  3. Настраивает колькоскоп, чтобы хорошо рассмотреть шейку.
  4. В цервикальный канал вводится специальная щеточка на длину 1,5-2 см. Забранный материал переносится на лабораторное стекло и помечается маркером.
  5. Далее доктор берет специальный шпателек Эйра, чтобы взять эпителий с шейки матки. Этот образец так же укладывается на стекло и помечается маркером.
  6. Если есть подозрительные участки на шейке матки, тогда делается соскоб и с них. Его так же помещают на стекло и маркируют.
  7. При жидкостной цитологии доктор все мазки отправит в капсулу с жидкостью, а потом лаборант после очищения отправит материал на стекло.
  8. В лаборатории материал исследуют на специальном аппарате, который запрограммирован для обнаружения атипичных клеток.
  9. Образец очищают от примесей: крови, слизи, спермы и отправляют на стекло.

Иногда женщину просят пересдать мазок. Однако при выполнении жидкостной цитологии данная просьба возникает довольно редко.

Показаниями для проведения обследования являются:

  • Нарушения менструального цикла. Слишком короткие и слишком длинные менструации, задержки.
  • При планировании беременности.
  • Длительный прием гормональных препаратов.
  • Появление выделений без причины.
  • Перед установкой влагалищных средств контрацепции.
  • При вирусных генитальных патологиях.

По показаниям, врач забирает биоматериал из цервикального канала и направляет на диагностику. Для максимальной информативности материал на жидкостную цитологию лучше всего сдавать в первые десять дней после окончания месячных.

Полученный результат может быть отрицательным или положительным. Последний говорит о наличие атипичных клеток, которые могут привести к развитию онкологии.

  1. Препарат для анализа готовится очень быстро.
  2. Для исследования применяется материал улучшенного качества.
  3. Материалы можно хранить длительное время. Использование особых растворов позволяет сохранить забранные образцы при благоприятных условиях. Это необходимо для транспортировки мазков в лабораторию.
  4. Из полученного биоматериала можно готовить несколько цитологических препаратов.
  5. Можно готовить монослойный мазок.
  6. При диагностике используется стандартный метод окрашивания.

Новая технология обследования на рак, в сравнении с другими методиками, позволяет повысить качество мазка, а также проводить дополнительные диагностические процедуры без повторного обследования у гинеколога.

Для своевременного предупреждения скрининг проводят раз в полгода. Этот метод помогает предупредить на ранних стадиях развитие рака шейки матки, а также диагностировать предраковые, фоновые процессы в цервикальном канале.

Подготовка к анализу

Процедуру проводят в первую неделю после окончания менструального кровотечения. За сутки до мазка необходимо исключить пользование специальными средствами для интимной гигиены, не делать спринцеваний.

Также стоит отказаться от:

  • использования вагинальных свечей, мазей;
  • употребления противовоспалительных препаратов, КОК;
  • использования менструальных чаш или тампонов за 2 суток до анализа;
  • сексуальных отношений за 2 дня до взятия материала.

Во время консультации необходимо уведомить врача о:

  • перенесенных болезнях репродуктивной системы;
  • приеме каких-либо лекарственных препаратов;
  • начале и окончании менструации в последний месяц;
  • наличии каких-либо жалоб.

Подготовка к жидкостной цитологии шейки матки также требует воздержания от мочеиспускания за 2-3 часа до взятия материала.

Материал из шейки матки для жидкостной цитологии забирают довольно быстро. Процедура проходит в гинекологическом кабинете, когда пациентка находится на специальном кресле.

Забор происходит безболезненно. За 2 часа пациентке следует перестать мочиться. Кроме этого, анализ не берут во время месячных, воспаления и других выделений из влагалища.

Воздержаться перед тестом от:

  • Секса в течение 2 суток до анализа;
  • Спринцевания;
  • Использования свечей и смазок;
  • Употребления таблеток и противозачаточных средств;
  • Использования тампонов.

Если все требования соблюдены, тогда доктор промакивает шейку матки тампоном из ваты, а далее при помощи щеточки делает забор биоматериала. После помещает его в специальную жидкую среду и отправляет в лабораторию для изучения. Ответ на тест обычно приходит через 10 дней.

Процедура забора

Получение биоматериала проводится во время осмотра пациентки в гинекологическом кресле. Щеточкой, разработанной специально для этой методики, с шейки берут материал для дальнейшего изучения.

В случае хорошего результата, который подтверждает отсутствие каких-либо заболеваний, рекомендован повторный профилактический тест через 1 год.

Полученный и стабилизированный материал исследуют с помощью специального автоматического процессора, который изготавливает препараты по установленной программе.

Необходим определенный объем образца (затем он очищается с помощью вакуумного фильтра и помещается на предметное стекло), который затем подвергается изучению.

Жидкостная цитология обеспечивает 95% чувствительность теста (цитологический анализ — до 60%).

Жидкостная цитология — что это такое? Как к ней подготовиться? Данная технология – это самый быстрый метод исследования материала, помогающий получить максимум информации, увидеть любые, даже самые незначительные отклонения в клетках шейки матки.

Прежде чем сдавать мазок, следует подготовиться. Для этого рекомендуется исключить любые сексуальные отношения за двое суток до сдачи анализа. Также нельзя проводить спринцевания, применять свечи и мази.

Рекомендуется прекратить прием контрацептивов и противовоспалительных препаратов. За пару часов до взятия мазка следует воздержаться от мочеиспускания.

Анализ не берется во время менструации, при наличии выделений, зуде, воспалении половых органов.

Техника забора мазка для исследования проста. Во время осмотра гинеколог очищает шейку матки ватным тампоном, а затем специальной щеточкой, выполняет забор материала для анализа и наносит его на стекло. Результаты обследования готовы примерно через неделю.

Цитологический мазок дает возможность определить, какой размер и форму имеют патологические клетки, их размещение. Все это помогает выявить болезни шейки матки, в числе которых раковые и предраковые недуги.

При использовании жидкостной цитологии щеточка вместе с забранными биоматериалами помещается в стабилизирующий раствор. Так клетки сохраняются длительное время, что дает возможность провести исследование и точно поставить диагноз.

Расшифровка результатов

Казаишвили Т.Н.

Kazaishvili T.N.

Резюме

Abstract

Список литературы

Для ранней диагностики CIN широко применяют цитологический метод Pap-тест и молекулярные методы выявления ДНК ВПЧ [15, 42].

Во многих странах с целью ранней диагностики и снижения заболеваемости РШМ разработаны скрининговые программы, включающие рутинное проведение цитологического метода исследования Pap-тест (тест по Папаниколау).

В настоящее время в странах Европы и США цитологическое исследование рекомендовано проводить 1 раз в 3 года, начиная с возраста 21 год или спустя 3 года от начала половой жизни [16].

2012 №572н регламентированы лишь общие положения о целесообразности проведения ежегодных профилактических осмотров женщин с цитологическим исследованием мазков с экзо- и эндоцервикса.

Диагностика ВПЧ-ассоциированных заболеваний шейки матки должна быть комплексной и базироваться на проведении ряда исследований: выявление ДНК ВПЧ с помощью реакции гибридизации вирусной ДНК с РНК-зондом (Digene-тест, Cobas HPV Test), выявление ДНК ВПЧ с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с типированием и определением количества геномных эквивалентов вируса;

цитологическое исследование (традиционная или жидкостная); определение онкопротеинов Е6 и Е7; оценка экспрессии онкопротеинов p16/Ki67 иммуноцитохимическим (ИЦХ), иммуногистохимическим (ИГХ) методами;

Однако на сегодняшний день данные о специфичности и чувствительности всех перечисленных методов неоднозначны.

Другим международным референтным тестом, который также используется для генотипирования ВПЧ, является тест-система Cobas.

Данный метод обеспечивает качественную детекцию 14 высокоонкогенных типов ВПЧ: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, а также генотипирование ВПЧ 16 и 18 типов в этом же анализе [17]. S. Phillips и соавт.

(2015) провели сравнительный анализ ВПЧ-тестирования 407 образцов с гистологически подтвержденным диагнозом CIN различной степени тяжести на тест-системах Cobas и Digene.

Показана корреляция между степенью тяжести плоскоклеточных интраэпителиальных поражений и наличием ВПЧ высокоонкогенных типов – чувствительность тест-системы Cobas составила 90,6%, Digene-теста – 86,1%, специфичность – 92,9 и 91,8 соответственно [18].

Особенностью ВПЧ-инфекции является тот факт, что в силу эпителиотропности вируса он не обнаруживается в крови, а выработка антител иммунной системой отмечается далеко не у всех инфицированных больных. При этом уровень антител очень низок и не способен обеспечить длительный и надежный иммунитет

В нашей стране также используется метод ПЦР диагностики в режиме реального времени, который позволяет провести генотипирование и количественное определение 21 типа ВПЧ (HPV КВАНТ – 21) – 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 44, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82, 6, 11.

Метод основан на реакции амплификации, в ходе которой молекулы праймеров связываются с фрагментами ДНК вируса в образце и в среде с добавлением катализаторов, под воздействием температуры происходит образование дочерних комплементарных двухцепочечных молекул ДНК.

По данным ряда авторов, для определения дисплазии высокой степени и РШМ необходимо проводить цитологическое исследование в сочетании с тестированием на ВПЧ, чувствительность достигает более 96% [20].

В последние годы помимо традиционной цитологии активно внедряется жидкостная цитология (ЖЦ) – высокоспецифичный метод.

Известно, что пусковым моментом неопластического процесса шейки матки является интеграция ВПЧ в геном клетки-хозяина, в ходе которого нарушается считывание генов Е1 и Е2, регулирующих экспрессию онкопротеинов Е6 и Е7.

Экспрессия специфических онкобелков Е6 и Е7 является необходимым условием злокачественного роста цервикальных клеток.

Установлено, что гены Е6 вызывают деградацию белков-супрессоров генов р53 и ВАХ, предотвращают апоптоз и деградацию тирозин-киназы, активацию теломеразы и подавляют выработку интерферона [24].

Исследования ряда авторов показали, что обнаружение м-РНК, кодирующих онкопротеины Е6 и Е7 вируса папилломы человека высокого онкогенного риска, является более специфическим предиктором персистирующей инфекции, чем обнаружение ДНК ВПЧ [26, 27].

По данным F. Karlsen (2009), специфичность показателей онкопротеинов Е6 и Е7 для LSIL (низкая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения) составляет 80% [28].

Чувствительность кольпоскопии для определения субклинической ПВИ, предрака и рака шейки матки составляет 80-90%, специфичность 30-60%. К преимуществам данного метода можно отнести возможность прицельной биопсии с наиболее подозрительных участков шейки матки для дальнейшего гистологического исследования с целью подтверждения или опровержения неопластического процесса

В последние годы одним из перспективных методов диагностики ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки является определение экспрессии маркеров пролиферации р16 и Ki 67, которые в свою очередь позволяют определить не только наличие вирусных белков в клетке, но и степень нарушений клеточной регуляции в ответ на персистенцию вируса в клетке.

Известно, что белок р16 (INK4A) [30, 43] является продуктом гена CDKN2A и подавляет активность циклин-зависимых киназ 4 и 6, которые регулируют G1-фазу клеточного цикла.

Экспрессия этого белка в нормальных клетках ограничена, однако при ВПЧ-инфекции онкобелок Е7 связывается с белком супрессором опухолей ретинобластомой (RB), что приводит к деградации последней и, как следствие, к избыточной экспрессии р16 [25].

Выявление атипичных клеток плоского эпителия шейки матки, экспрессирующих одновременно р16 и маркер пролиферации Ki67, указывает на индуцированное дисрегулирование клеточного цикла и обеспечивает более точную диагностику поражений высокой степени тяжести.

Первые исследования по определению р16 и Ki67 показали высокую специфичность метода [31]. H. Ikenberg и соавт. (2013) провели обследование 27 349 женщин из 196 медицинских центров в возрасте от 18 до 65 лет (средний возраст 39,9±11,4 года), которым был проведен цитологический скрининг, ВПЧ-тест и определение экспрессии р16 и Ki67 иммуно-гистохимическим методом.

Пациенткам с аномальными цитологическими мазками и/или положительным ВПЧ-тестом, и/или положительной экспрессией р16 и Ki67 выполнялась расширенная кольпоскопия (n=2301) и прицельная биопсия шейки матки (по показаниям).

Диагноз CIN2 был установлен в 205 биоптатах шейки матки. При этом окраска цитологических препаратов двойным иммуноцитохимическим методом показала наибольшую чувствительность по сравнению с мазком, окрашенным гематоксилин-эозином – 86 и 68,5% соответственно (р

Результаты жидкой цитологии шейки матки выявляют атипические изменения в строении тканей, а также воспаления и развитие инфекции.

Признаки очага воспаления:

  • лейкоциты, большое количество нейтрофильных лейкоцитов;
  • фагоциты;
  • плоскоклеточные интраэпителиальные поражения (ПИП).

Что показывает жидкостная цитология шейки матки, кроме наличия очагов воспаления?

Расшифровка аббревиатур в результате:

  • NILM — отсутствие атипичных клеток.
  • CIS — много атипичных клеток ( признак неинвазивного рака).
  • ASC-US — незначительное количество клеток плоского эпителия со слабо обозначенной атипией невыясненной этиологии.
  • ASC-H — атипичные включения плоского эпителия в небольшом количестве.
  • L-SIL — выявлены атипичные клетки с низкой степенью злокачественности, кайлоциты (легкая степень дисплазии).
  • H-SIL — большое количество атипичных клеток с раковыми поражениями (неинвазивный рак, средняя или тяжелая цервикальная дисплазия).
  • CA — большая часть клеток в биоматериале — атипичные и злокачественные (плоскоклеточный рак).
  • NOS — неуточненные изменения.
  • KA — атипия койлоцитическая (папилломавирусная инфекция — ВПЧ).
  • Метаплазированный эпителий — нормальный эпителий зоны трансформации.
  • Squamous cell carcinoma — плоскоклеточная инвазивная карцинома.
  • Squamous аtypia — плоскоклеточные атипичные изменения.

Окончательный диагноз утверждают только после проведения гистологического анализа биоматериала.

Жидкостная цитология разрешает определить различные патологии даже на начальных стадиях. Ниже приведены расшифрованные значения анализа.

Выделяют пять уровней развития болезни. На результате они описаны цифрами1-5.

  1. Клетки в норме, патологий нет.
  2. Эта стадия характеризует возможное воспаление в шейки матки. После этого женщину направляют на дополнительное исследование.
  3. В отдельных клетках выявлены изменения. Рекомендуют сделать цитологию еще раз.
  4. Видоизменения в клетках свидетельствуют о предраковом состоянии шейки матки.
  5. Высокий показатель атипичных клеток. Это говорит о первой стадии рака.

Исследование биоматериала шейки матки

Результаты жидкостной цитологии шейки матки могут быть как положительными, так и отрицательными. Чтобы врач смог точно определить наличие рака, он оценивает состояние эпителия.

  1. Норма. Если результаты цитологии отрицательные, то в строении клеток не обнаруживается никаких нарушений.
  2. На второй стадии клетки имеют незначительные отклонения от нормы. Данная стадия может говорить о воспалениях, наличие инфекционных заболеваний. Для точного диагноза необходимо проводить дополнительные методы обследования, такие как биопсия, кольпоскопия и т. д.
  3. Единичные клетки имеют аномальные изменения. При этом результате диагностики необходимо проводить повторное обследование.
  4. Строение клеток изменяется, они становятся предраковыми.
  5. Обнаружение большого количества атипичных клеток. Это указывает на начальную степень развития онкологии.

Расшифровка полученных результатов проводится по системе Бетесда. Окончательный диагноз устанавливается на основе полученных сведений об изменениях ядра клетки.

Последствия

Анализ отличается незначительным травмированием тканей, малозаметным дискомфортом.

Рекомендации после проведенной жидкостной цитологии включают воздержание от полового акта (48 часов). При ухудшении самочувствия, сильной боли необходимо обратиться за медицинской помощью.

Жидкостная цитология шейки матки — современный способ, заключающийся в особенном сохранении взятого мазка и дальнейшем его исследовании. Методика незаменима при скрининге рака шейки матки наравне с гистологическим анализом тканей.

Сразу после проведения забора материала женщине следует придерживаться воздержания от сексуальных контактов в течение двух суток. Лучше неделю не использовать тампоны. В остальном женщина будет вести обычный образ жизни.

Проблемы могут возникнуть только при неправильном произведении забора материала для жидкостной цитологии. Если доктор не опытен и сделает это грубо, то возможен стеноз и образование спаек.

Стоимость

Цена этого исследования зависит от места проведения анализа и способа его проведения. Ниже приведены три центра, в которых производят жидкостную цитологию шейки матки.

Название центра Цена
Синево 1695 рублей
Инвитро 1445 рублей
ЦЭЛТ Москва 2000 рублей

Итак, жидкостная цитология материала из шейки матки – это наиболее информативный способ обследования женского здоровья на присутствие онкологии, ведь чувствительность анализа достигает 95%!

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицинский взгляд на еду