Методы забора материала для цитологического исследования — LiveAcademy

Методика забора мазка для цитологического исследования по Папаниколау

· Материал для мазка берут перед бимануальным исследованием;

· Сначала проводят забор материала для цитологического исследования, а потом — для выявления возбудителей инфекций, передающихся половым путём;

· При обильных выделениях из половых путей перед исследованием их удаляют большим тампоном;

· Сначала берут соскоб с шейки матки, а потом из цервикального канала;

· Допустимо два образца (с экзоцервикса и эндоцервикса) наносить на одно стекло;

· Небольшие кровянистые выделения не влияют на результат цитологического исследования, но при обильном кровотечении забор материала следует отложить.

Полученный материал равномерно распределяют тонким слоем по специально обработанному обезжиренному предметному стеклу, чтобы не было комков, и немедленно фиксируют, пока мазок еще не высох, смесью эфир/96% этиловый спирт или только 96% этиловым спиртом.

При использовании фиксирующих аэрозолей головку распылителя следует держать на расстоянии не менее 25 см от предметного стекла, чтобы не нарушить расположение клеток.

Забор материала для исследования на р16 (жидкостная цитология)

Забор материала рекомендуется производить при помощи одноразовой цервикальной щеточки (cervix-brush). Конус щеточки осторожно направляется в цервикальный канал.

После введения в него конуса остальная часть щеточки прижимается к поверхности эктоцервикса, и производится 5 полных круговых вращений — три по часовой стрелке и два — против часовой стрелки.

Перед проведением данных манипуляций необходимо тщательно очистить шейку матки от слизи. Это чрезвычайно важно, так как слизь в дальнейшем затрудняет интерпретацию результатов иммуноцитохимического окрашивания.

Щеточку с материалом необходимо опустить в контейнер с жидкой транспортной средой и тщательно ополоснуть ее там. При этом нужно стараться, чтобы «щетинки» cervix-brushполностью погружались в раствор.

Щеточка cervix-brush позволяет забирать клеточный материал не только с эктоцервикса, но и с расположенной в области наружного зева зоны трансформации и в большинстве случаев с наружной трети цервикального канала.

Поэтому при скрининговом исследовании (т. е. когда нет подозрения на патологию шейки матки) можно ограничиться использованием щеточки cervix-brush. Если врач считает, что требуется более тщательный забор материала с эндоцекрвикса, то можно дополнительно воспользоваться щеточкой типа цито — brush.

· до этого методом привычной цитологии уже была диагностирована дисплазия;

· пациентка в прошлом проходила лечение от дисплазии;

· имеются жалобы на ациклические либо контактные кровомазания;

· пациентка в прошлом перенесла конизацию или диатермокоагуляцию шейки матки;

· если при кольпоскопии анияого методом привычной цитологии уже была диагностирована дисплазэлементы аномальной зоны трансформации уходят в цервикальный канал, и стык эпителиев не визуализируется.

Бывают случаи, когда у пожилых пациенток суженный или атрезированный наружный зев не пропускает мягкие ворсинки конуса Cervix-brush. Тогда мы рекомендуем взять щеточкой Cervix-brush материал только с эктоцервикса, так как вы бы это сделали шпателем, но, совершив большее число разнообразных движений по эктоцервиксу, так чтобы все ворсинки щеточки были задействованы.

Затем следует попытаться получить мазок с эндоцервикса щеточкой цито-brush, которую легче провести в суженный цервикальный канал. Если пройти за наружный зев не удается, то пометьте в направлении и амбулаторной карте, что наружный зев атрезирован и мазок с эндоцервикса не получен.

В чем отличие цитологическое и гистологического исследований?

Важно: получение объекта исследований для «цитологии» связано с меньшей травматичностью.

При анализе тканей «на гистологию» забор проводится в ходе биопсии, после чего изучаются тканевые срезы. В ходе цитологического анализа исследуются только сами клеточные структуры.

Заключение ставится на основании тех или иных патологий ядерных структур, клеточных комплексов, цитоплазмы, а также изменения физиологического ядерно-цитоплазменного соотношения.

Обе методики базируются на прижизненном анализе небольшого участка ткани. Для цитологического анализа требуется количественно меньший объем исследуемого материала.

Сходства гистологического и цитологического исследования:

  • цель (установление наличия патологии);
  • методическая основа (морфологический анализ);
  • способы окраски перед микроскопией;
  • объект.

Принципиальные отличия методик:

  • сравнительно небольшой объем материала при цитологическом анализе;
  • высокая скорость подготовки материала при цитологии;
  • отсутствие необходимости в специализированной аппаратуре.

Методика забора мазка для цитологического исследования по Папаниколау

Материал для цитологического исследования получают разным путем. Так, эксфолиативный способ заключается в отстаивании биологических жидкостей от пациента (крови, мокроты), которые в результате расслаиваются: плазма отделяется от форменных элементов крови, а в мокроте выпадает в осадок слизь, эпителий и бактерии.

Можно получить материал для исследования с помощью соскоба или смывов, мазков отделяемого из свища, сосков молочных желез и др. Чаще таким образом получают материал для диагностики кожных (в том числе онкологических заболеваний.

Для цитологического исследования щитовидной железы, костного мозга, ликвора, кист, опухолей и внутренних органов материал берут у больного пункцией. Для этого делают прокол иглой (инъекционной или специальной) и забирают жидкое содержимое полостных образований с помощью обычного шприца.

Забор тканей внутренних органов для исследования называется биопсией, которую выполняют специальными инструментами. Можно подвергнуть анализу и частицы твердых тканей, оставшихся в полости иглы или инструмента для биопсии после прокола.

ПОДРОБНЕЕ:   Анализ у мужчин для определения инфекций в уретре

Образцы тканей внутренних органов для исследования можно взять с помощью эндоскопической биопсии: в желудочно-кишечный тракт, бронхи или брюшную полость вводят гибкий прибор с волоконной оптической системой и режущим инструментом.

Затем выбирают наиболее подозрительное на патологию место и выполняют несколько срезов тканей. При этом соблюдают следующее правило: первый срез делают на наиболее измененном участке органа, а затем берут еще несколько проб из прилегающих зон и других очагов поражения.

Пункция и биопсия — сложные способы забора материала для исследования, часто они достаточно болезненны, а потому их проводят с обезболиванием, зато именно они позволяют свести ошибку в диагнозе к минимуму.

Исследуют как окрашенные и фиксированные образцы тканей, так и живые. Анализ проводят с помощью микроскопии и химических реакций. Цитологические исследования полученного материала достаточно быстры в исполнении и относятся к прижизненной диагностике.

Наиболее широко их используют для выявления раковых и предраковых заболеваний при массовых профилактических осмотрах. В ходе исследования определяют тип эпителиальных клеток, стадию их развития и патологические изменения в них.

В зависимости от способа получения материала от больного для исследования можно определить размеры злокачественной опухоли, распространенность процесса (частичное, полное поражение органа, переход на окружающие орган ткани и соседние органы).

Большое значение для цитологического исследования имеют точные данные о происхождении материала, особенно если он взят из нескольких мест. Поэтому все мазки и соскобы после забора необходимо правильно маркировать (пометки делают и на предметном стекле и в сопроводительной документации).

Для получения достоверных результатов цитологического исследования важны сведения о проводимом лечении, так как многие лекарственные препараты (гормоны, цитостатики) оказывают непосредственное воздействие на клетки и изменяют их состояние.

Кроме того, при неправильном выборе места для забора материала от больного заболевание может быть не выявлено. Если результат анализа вызывает сомнение, то назначают повторное цитологическое исследование.

1) изменение расположения клеток относительно друг друга в определенных тканях (наслоение, группировки);

2) нечеткие границы;

3) одновременное присутствие живых измененных и мертвых клеток;

4) изменение размеров клеток (уменьшение, увеличение);

5) изменение формы клеток;

6) разнообразие клеток по структуре (в исследуемом материале присутствуют клетки различных стадий развития, много незрелых клеток);

7) окрашивание цитоплазмы в синий цвет химическими красителями;

8) наличие в цитоплазме множества вакуолей, твердых включений;

9) разнообразие ядер по структуре;

10) увеличение размеров ядер;

11) изменение объемного соотношения между ядром и цитоплазмой;

12) неравномерное распределение хроматина;

13) изменение структуры хроматина;

14) усиленное окрашивание ядер;

15) наличие ядер с разной степенью окрашивания;

16) увеличение размеров ядрышек и их числа;

17) увеличение числа клеток находящихся в состоянии митоза (деления);

18) наличие клеток с неправильным делением.

Весь материал представлен для ознакомительных целей

Согласно статистике, за последние 10 лет количество онкологических заболеваний в России увеличилось на 25,5%. Рак шейки матки в списке лидирующих онкологических заболеваний.

Онкологическая патология шейки матки развивается постепенно из предшествующих поражений, поэтому существует реальная возможность предотвращения рака путем диагностики и лечения этих поражений-предшественников (рис.1).

На сегодняшний день рак шейки матки — это та патология, развитие которой действительно можно предотвратить, для этого необходимо по крайней мере 1 раз в год посещать акушера-гинеколога.

Наибольшее количество цервикальных поражений, в том числе и тяжелых, приходится на ранний репродуктивный возраст. Поэтому проведение исследования шейки матки необходимо начинать как можно раньше: с 18 лет или с возраста начала половой жизни.

Основной метод поиска патологии шейки матки — цитологический, то есть исследование клеточных мазков с поверхности шейки матки (Пап-тест). С помощью специального шпателя или щеточки врач собирает клетки с поверхности шейки матки и из цервикального канала, наносит этот материал на предметное стекло, затем в лаборатории мазок окрашивают и исследуют под микроскопом.

Цитологическое исследование безболезненно, доступно любой женщине, требует небольших финансовых затрат, и, самое главное, позволяет врачу диагностировать злокачественный процесс в начальной стадии.

Цитологический скрининг признан классическим методом и рекомендован ВОЗ для проведения в масштабах национальных программ. Однако наряду с явными «плюсами» цитологическое исследование имеет и существенные недостатки, которые могут затруднить работу врача и задержать своевременное лечение.

Информативность цитологического метода зависит от уровня подготовки специалистов, а также качества забора материала для цитологического исследования, так как неправильный забор материала повышает частоту ложноотрицательных результатов.

Мазок может получиться слишком толстым (рис.2) или тонким, может быть загрязнен элементами крови, элементами воспаления, спермицидными и антибактериальными кремами, которыми женщина пользовалась в ближайшее время.

Врач может плохо распределить клеточный материал на стекле или плохо окрасить мазок. В результате подобных ошибок определенная часть женщин с цервикальным раком имеет в прошлом «хорошие» мазки перед развитием онкологической патологии.

Основным путем повышения достоверности цитологического метода исследования является использование метода “жидкостной цитологии”. Врач собирает клетки с поверхности шейки матки и из цервикального канала с помощью специальной щеточки и вместе со съемной щеточкой помещает во флакон со стабилизирующим раствором, который “консервирует” собранный клеточный материал, препятствует повреждению клеток, позволяет избежать бактериального загрязнения и в оптимальных условиях доставить собранные клетки в лабораторию.

ПОДРОБНЕЕ:   Как проводят цитологическое исследование

Помимо этого материал, полученный методом “жидкостной цитологии”, устойчив к колебаниям температуры, хранится в течение нескольких месяцев и может быть использован для проведения дополнительных или контрольных исследований.

После поступления флакона с материалом в лабораторию проводят его обработку, выполняя несколько операций: смывание клеток с щеточки инструмента и получение суспензии клеток в специальной среде со стабилизацией клеток, разрушением белка, удалением слизи, разрушением эритроцитов и фиксацией “в объеме”.

Далее следуют мероприятия регулирующие плотность клеток на стекле (концентрирование или разведение). Препарат получается тонкослойным (клетки на стекле расположены в один слой (рис.3)).

Экспертами ВОЗ подсчитано, что скрининг женщин в возрасте 25–64 лет с интервалом в 5 лет может привести к снижению смертности от рака шейки матки на 84%.

В Многопрофильной клинике ТюмГМА проводится цитологическое исследование соскоба шейки матки и цервикального канала как классическим ПАП-методом (№ в прейскуранте 14027, стоимость – 255 рублей), так и методом «жидкостной цитологии» ((№ в прейскуранте 14034, стоимость 500 рублей).

Более подробную информацию о заболевании вы можете получить на сайте Европейского общества рака шейки матки //www. ecca. info/ru/cervical-cancer. html.

Лабораторией Многопрофильной клиники ТюмГМА, к. м.н.

//mybiblioteka. su/11-29814.html

//analizy. vse-zabolevaniya. ru/citologicheskij-metod/

//klinika. tyumsmu. ru/sovremennyie-metodyi-czitologicheskogo-skrininga-shejki-matki. html

Какой материал применяется для цитологического исследования?

Для анализа применяются 3 разновидности материала:

  • эксфолиативный (жидкое отделяемое, смывы, соскобы, отпечатки);
  • пунктаты (получают с помощью аспирационной иглы);
  • отпечатки удаленного при оперативном вмешательстве фрагмента ткани.

Наиболее часто для микроскопии берутся моча, смывы, полученные при эндоскопии, мокрота, отделяемое из молочных желез, соскобы с участков эрозий, отпечатки ран, свищей или язвенных поражений, амниотическая и спинномозговая жидкость и т. д.

Важно: при офтальмологических патологиях часто необходим соскоб с поверхности роговицы или возможность получить аспирационной иглой жидкость из стекловидного тела.

Минусом цитологического анализа является возможность оценивать морфологические изменения на очень ограниченном участке ткани, что несколько снижает диагностическую ценность процедуры.

При изготовлении мазка для микроскопии часто меняются пространственные взаимоотношения элементов ткани, чего не наблюдается при гистологическом срезе.

Обратите внимание: если необходимо точно выявить взаиморасположение клеточных элементов и межклеточной жидкости, предпочтение следует отдавать гистологическому исследованию.

Цитологическое исследование часто используется непосредственно в ходе операции, когда возникает необходимость неотложного решения первостепенных диагностических задач.

Оно необходимо, в частности, если нужно выявить, имеет ли место прорастание злокачественной опухоли в расположенные рядом ткани, или имеются ли вторичные очаги (метастазы).

Особенно важным представляется данная разновидность лабораторного исследования, если хирургу приходится иметь дело с мелкими или рыхлыми патологическими очагами, из которых проблематично в короткие сроки приготовить полноценный гистологический препарат.

Важно: методика дает возможность выявить онкологические заболевания на ранних стадиях и подобрать оптимальную методику ведения заболевания.

Материал для цитологического исследования может быть получен различ­ными способами

— отделяемое различных органов ( молочная железа, бронхи и др.

Для приготовления препарата капля отделяемого наносится на стекло и го­товится мазок. Можно также делать отпечатки с места выделения (сосок мо­лочной железы, выходное отверстие свища).

— отпечатки со слизистых и кожных покровов, если это доступно, можно делать непосредственно на стекло. В цругил случаях мазки готовят из соско — Оов шпателем, с тампонов.

Для исследования экс фолиативного материала в гинекологии существуют отработанные методики, описание которых — в соответствующем разделе,

Б, Пупкциошшя цитология — один из наиболее частых видов исследования в клинической цитологии.

Пункция опухолевых образований производится, как правило, топкой и»- лой. Для проведения асмирационной биопсии необходим определенный навык. Кроме того, для получении полноценней о материала необходимо соблюдать ряд условий.

В частности, игла и шприц для пункции должны быть сухими. Не следует проводить предварительную анестезию (введение новокаина). Для пункции богато васкулизироваиных образований (щитовидная железа, сосуди­стые опухоли, кость и др.

), необходимо использовать иглу с мандреном, пос­ледний извлекается после введения иглы в место, из которых предполагается получить материал. Таким же образом, соблюдая вышеописанные правила и используя специальные приспособления, осуществляют пункции под контро­лем рентгена, ультразвука или компьютерной томо! рафии.

Я Использование для цитологического исследования мазков — отпе­чатков с биопсийного и операционного «черпала значительно повышает эф­фективность цитологической диагностики.

Кроме того, морфологическое за­ключение может быть получено значительно ран»ше. — уем гистологическое. Следует от,«^,п’гь исключительную ценность таких параллельных исследова­ний (цитологических и гистологических) в возможности проведения цито!

— мазки-отпечатки щипковых биопсий.

А) бронхоскопия — мазки ще точкой, трансбронхиальные пунктаты, мазки

Из материала щипковых биопсий, промывные воды.

Б) гастроскопия — мазки щеточкой, отпеча тки с щипковых биопсий,

В) колоноскопия, ректороманоскопия — мазки с ватным тампоном, щеточ­ные мазки, отпечатки с биопсий,

Г) цистоскопия — нативная моча, спиртовый смыв, отпечатки с биопсийных кусочков,

Д) ларингоскопии — мазки с участков поражения и отпечатки с кусочков,

ПОДРОБНЕЕ:   Цитологическое исследование после выкидыша

Е) кожа и слизистые оболочки — мазки соскобов с участков поражения, при опухоли — пункция тонкой иглой,

Ж) мягкие ткани, молочная железа, лимфатические уг^лы. щитовидная же­леза — пункция тонкой иглой,

З) пункция под контролем ультразвука( щитов ид пая железа, опухоли шеи, печень, селезенка, почки, матка, яичники, предстательная железа, забрюшин — ные опухоли).

И) цитологическому исследованию обязательно должны подвергаться пун­ктаты серозных полостей, кист, отделяемое молочной железы и др. Стекла для препаратов должны быть чистые, обезжиренные и сухие.

Выбор способа взятия ма териала определяется характером поражения, ло­кализацией, возможностью проведения инструментальных исследований.

Желательно исследование в комплексе всех доступных методов взятии ма­териала. В частности, при поражениях мочевого пузыря для цитологического исследования може т быть использована нативная моча (эффективность цито­логической диа! ностики 40-50%), спиртовой еммп (эффективность цитологи-

Ческой диагностики 60-65%), .».азки-отпечатки с кусочков опухоли, взятых при цистоскопии (эффективность цитологической диагностик», 90%;.

При комплекс^.», обследовании эффективность цитологической диагностики составляет около 100%.

Российская медицинская академия последипломного образования

Материалом для цитологической диагностики может быть:

    пунктах молочной железы; отпечатки с биоптата; соскоб с ткани молочной железы (или опухоли), удаленной во время операции; выделения из соска (метод практически неэффективен для диагностики злокачественных новообразований молочной железы, за исключением внутрипротокового рака); материал, полученный с эрозивных поверхностей.

Для диагностического заключения по цитологическим препаратам важно получение полноценного материала: он должен быть взят не из окружающих тканей, а из очага поражения.

Трудности могут отмечаться при выраженном фиброзе или наличии кистозно измененных участков, в таких случаях нужно пытаться получить материал из разных участков опухоли, из стенок кисты;

При проведении диагностической пункции необходимо соблюдать ряд правил:

    Игла и шприц для пункции должны быть абсолютно сухими. Не следует проводить анестезию пунктируемого образования в связи с тем, что сама пункция обычно не более болезненна, чем прокол иглой для анестезии, кроме того, применение новокаина может вызвать изменение клеточных элементов. Мандреном, как правило, не пользуются, так как иглы, применяемые для диагностических пункций, имеют очень маленький диаметр и косой срез; игла легко продвигается через ткани, расположенные над пораженным участком (кожу, подкожную клетчатку, мышцы), расслаивая их, поэтому закупорка иглы происходит очень редко. Нельзя пунктировать опухоль при подозрении на меланому. Пункцию выполняют с соблюдением правил асептики и антисептики.

Техника выполнения пункции

Пункцию проводит лечащий врач или врач клинической лабораторной диагностики в процедурном кабинете, иногда — в больничной палате (в зависимости от тяжести состояния больного).

Если требуется контроль за положением иглы (опухоль небольших размеров, образование с кальцинатами и проч.), пункция выполняется под рентгенологическим контролем или под контролем ультразвукового исследования, компьютерной томографии и других методов в соответствующем кабинете.

Перед проведением пункции участок поражения тщательно пальпируют, определяют его подвижность, связь с окружающими тканями и возможность оптимальной фиксации. Опухоль фиксируют пальцами левой руки (если пунктирующий врач — правша).

Опухоль при пальпации кажется расположенной более поверхностно, чем на самом деле, поэтому угол направления иглы при аспирационной пункции не должен быть перпендикулярен к ребрам.

Это особенно важно соблюдать при маленькой молочной железе, в которой опухоль может находиться близко к грудной стенке, и игла может попасть в ребро.

Если игла попадет в ребро, в мазках можно обнаружить элементы костно-мозгового кроветворения (мегакариоциты, бластные клетки, миелоциты, эритробласты и проч.).

Пункцию производят тонкой иглой (наружный диаметр 0,6-0,7 мм), которая присоединяется к шприцу 10-20 мл. Иглу без шприца (или с присоединенным шприцем с опущенным поршнем) вводят через кожу в исследуемое образование под небольшим углом к грудной стенке.

По достижении очага поражения осторожно пальпируют ткань вокруг введенной иглы, определяя правильность прокола; при небольшом подкожном узле можно несколько наклонить иглу, при этом опухоль на игле сместится, что ощущается пальцами и подтверждает правильное ее положение.

Не рекомендуется производить вращательные движения иглой, так как это наносит лишнюю травму, не приводя к получению более полноценного материала. После этого присоединяют шприц с опущенным поршнем (если он не был присоединен сразу) и делают два-три резких насасывающих движения, снимая шприц с иглы после каждого подъема поршня.

По окончании взятия шприц необходимо снять, иглу извлекать без шприца, что позволяет сохранить материал; для цитологического исследования обычно достаточно материала, попавшего в просвет иглы.

Достоверность цитологического исследования

Степень достоверности анализа клеточных структур напрямую зависит от чувствительности и специфичности метода, а также строгого соблюдения технологии.

В наши дни достоверность результатов анализов существенно повышена благодаря следующим методикам:

  • цитоспектрофотометрия;
  • кариометрия;
  • цитометрия;
  • иммуноцитохимические тесты;
  • математические методы.

Свое применение нашли также такие инновационные методики, как люминесцентная, поляризационная и фазово-контрастная микроскопия.

Плисов Владимир, медицинский обозреватель

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Медицинский взгляд на еду
Adblock
detector